研究背景与目的：重症肌无力（myasthenia gravis，MG）是一种乙酰胆碱受体抗体（acetylcholine receptor antibody，AchRAb）作用于神经肌肉接头处（neuromuscular junction，NMJ）突触后膜乙酰胆碱受体（acetylcholine receptor，AchR）而引起的自身免疫性疾病。其发病多见于儿童，其致病机制目前尚未澄清。多数儿童MG患者存在体液免疫和细胞免疫功能异常，且有胸腺增生或胸腺瘤。Fas分子是细胞膜表面重要的凋亡相关分子之一，尤其与T细胞的细胞毒作用、诱导活化细胞死亡以及胸腺细胞阴性选择有关。近年来研究资料表明，通过实验MG动物模型和对儿童重症肌无力患者研究发现，外周血和胸腺淋巴细胞存在Fas基因突变引起Fas分子表达紊乱。为更进一步揭示Fas分子与胸腺细胞发育成熟以及与淋巴细胞亚群功能的关系，本研究用流式细胞仪对儿童重症肌无力患者胸腺细胞和外周血淋巴细胞亚群的Fas分子、CD4、CD8分子表达情况及产生的细胞因子IFN-γ、TNF-α进行分析，以揭示儿童MG的发病机制，为临床治疗提供一定的实验理论依据。方法：对10例MG患儿和10例同年龄非自身免疫病正常对照组胸腺采用机械分离法获取胸腺细胞，采用淋巴细胞分离液离心分离外周血淋巴细胞，用非抗凝血自然凝固后分离出血清。用荧光标记单克隆抗体（Fas-FITC、CD4-PE、CD8-Cy），经流式细胞仪测定细胞表面Fas、CD4、CD8的表达情况，用双抗体夹心法测定血清细胞因子的水平。统计学分析采用SPSS10.0软件对数据进行处理，以α=0.05作为检验标准。结果：1．儿童重症肌无力患者胸腺CD4+CD8+双阳性细胞百分率（42.12±9.70）明显低于对照组（85.25±4.53），CD8+细胞百分率（22.50±8.65）明显高于对照组（5.50±3.13）。儿童MG患者CD4+Fas+和CD8+Fas+胸腺细胞百分率与对照组有显著性差异，中P＜0.01。2．儿童重症肌无力患者外周血淋巴细胞膜表面Fas表达率（36.31±5.68）明显高于对照组，CD4+CD8-百分率（65.27±7.25）也高于对照组。CD4-CD8+百分率（20.71±8.06）低于对照组，与对照组有显著性差异，P＜0.05。3．儿童重症肌无力患者血清sFas水平高于对照组，P＜0.01，且与血清AchRAb水平呈正相关。4．儿童重症肌无力患者血清中细胞因子IFN-γ、TNF-α水平增高且与血清AchRAb水平呈正相关。结论：1．儿童重症肌无力患者胸腺细胞Fas表达降低，外周血淋巴细胞Fas表达增高说明重症肌无力患者存在胸腺细胞凋亡障碍和外周血淋巴细胞活化增强，这可能是MG发病的重要因素。2．IFN-γ、TNF-α与AchRAb水平正相关表明其可能参与自身AchRAb的形成，与自身反应性疾病的发生有关。
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