(一)中文摘要【目的】①明确重组腺病毒AD-GFP-NM-23-H1对人恶性黑色素瘤细胞株A375的转染能力。②观察重组腺病毒AD-GFP-NM-23-H1对A375细胞增殖的影响。③初步确定适宜的A375细胞转染滴度和转染后蛋白的表达时间。【方法】1、重新构建纯化出重组AD-GFP-NM-23-H1腺病毒。2、实验分为四个小组,第一组转导AD-GFP-NM23-H1,滴度为108PFU/ml,第二组转导AD-EGFP-NM23-H1,滴度为109FU/ml,第三组转导AD-EGFP-NM23-H1,滴度为1010FU/ml,第四组为空白对照组。在荧光显微镜下观察细胞的转染情况,并利用MTT法检测不同转染滴度转染重组AD-GFP-NM-23-H1对肿瘤细胞A375的增殖的影响,通过其生长曲线的绘制及应用spss11.5进行统计分析,数据采用单因素方差分析,比较各组之间细胞生长能力的差异。【结果】实验结果经过统计分析后,转染AD-GFP-NM-23-H1的肿瘤细胞的小组与空白对照小组具有显著性差异(P<0.05),转染滴度为108PFU/小组与转染滴度为109PFU/ml、1010PFU/ml小组有显著性差异,而这两个转染滴度较高的细胞之间没有显著性差异(P>0.05)。【结论】重组腺病毒AD-GFP-NM-23-H1能成功的转染A375细胞,并对该细胞的增殖呈抑制作用。
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