抗CD3人鼠嵌合抗体轻链在毕赤酵母中大规模发酵表达的研究
论文摘要
本研究选择酵母偏爱密码子同义替换鼠源性抗CD3抗体轻链可变区基因（Vκ）,与人源性轻链恒定区（Cκ）基因连接,构建完整的人鼠嵌合抗体轻链。将构建的完整的人鼠嵌合表达载体转化X-33毕赤酵母,建立兼具原核系统良好操作性和真核系统后加工性的重组抗CD3抗体毕赤酵母真核表达体系。在初步研究了发酵最佳条件后在80L发酵罐中进行大规模发酵表达,并对后续下游纯化条件做了初步探讨。结果表明,本研究正确构建了重组抗CD3抗体毕赤酵母真核表达体系,经甲醇诱导能够分泌重组抗CD3抗体轻链蛋白,重组抗CD3抗体轻链的表达具有累积效应,产量在一段时间内随表达时间延长而增加。本研究为进一步用毕赤酵母作为生物反应器大规模生产抗CD3抗体提供了实验依据。
论文目录
提要英文缩略词前言第一章 文献回顾第一节 抗CD3 抗体的结构特征第二节 抗CD3 抗体的生物学特性及临床研究第三节 立题依据第二章 抗CD3 人鼠嵌合抗体轻链的构建第一节 材料和方法第二节 结果第三节 讨论第三章 抗CD3 人鼠嵌合抗体轻链在毕赤酵母中的表达第一节 材料和方法第二节 结果第三节 讨论第四章 抗CD3 人鼠嵌合抗体轻链大规模发酵及纯化第一节 材料和方法第二节 结果第三节 讨论研究总结参考文献中文摘要英文摘要致谢
相关论文文献
- [1].人鼠嵌合抗体的基因构建[J]. 中国生物制品学杂志 2009(09)
- [2].抗CD25人鼠嵌合抗体基因真核表达质粒的构建与瞬时表达[J]. 中国生物制品学杂志 2010(02)
- [3].抗白念珠菌人鼠嵌合抗体真核表达载体的构建与表达[J]. 中国皮肤性病学杂志 2008(05)
- [4].抗FGF2人鼠嵌合抗体在HEK293T细胞中的表达优化[J]. 中国生物工程杂志 2014(05)
- [5].抗p185~(erbB2)人鼠嵌合抗体ChAb26转基因小鼠乳腺生物反应器的制备与验证[J]. 中国生物工程杂志 2019(08)
- [6].抗人CD25人鼠嵌合抗体在CHO细胞中的稳定表达及初步鉴定[J]. 中国生物制品学杂志 2010(10)
- [7].抗p185~(erbB2)人鼠嵌合抗体慢病毒表达载体的构建[J]. 生物医学工程学杂志 2013(02)
本文来源: https://www.lw50.cn/article/57f1fd80699ee373359c33b3.html