大鼠脊髓神经干细胞的分离、培养和鉴定

论文摘要

目的探讨出生1～3天SD大鼠脊髓神经干细胞的分离、培养及鉴定方法。建立了一种简便易行的NSCs获取方法,为进一步脊髓神经损伤修复的动物实验提供依据。方法取出生1～3天SD大鼠乳鼠脊髓,吸管吹打机械分离制成单细胞悬液,采用无血清培养和胎牛血清诱导分化,后于相差显微镜下进行形态学观察及免疫细胞化学进行鉴定。结果原代及传代培养均观察到形成细胞克隆,克隆中的细胞巢蛋白(nestin)表达阳性,显微镜下观察见典型的干细胞特征,诱导后可分化GFAP表达阳性的胶质细胞。结论分离和培养的细胞能表达神经干细胞的特异性标志物巢蛋白,并且具有很强的增殖能力和多向分化潜能,说明大鼠乳鼠脊髓中存在神经干细胞,并可用于进一步的实验研究。

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摘要

Abstract

前言

资料和方法

1. 材料

1.1 试验动物

1.2 主要实验设备及试剂

1.3 无血清NSCs 基础培养液基

1.4 PBS 缓冲液的配制

2. 方法

2.1 乳鼠的获取

2.2 脊髓神经干细胞的分离与培养

2.3 脊髓神经干细胞的传代

2.4 脊髓神经干细胞的鉴定

2.5 脊髓神经干细胞的分化

2.6 免疫细胞化学染色

2.7 脊髓神经干细胞形态学观察和纯度检测

结果

讨论

小结

致谢

参考文献

综述

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