目的:通过测定NOS的含量及糖尿病性ED大鼠阴茎海绵体神经递质NOS亚型mRNA的表达,研究补肾中药对糖尿病性ED大鼠阴茎海绵体神经递质NOS亚型mRNA影响。探讨补肾中药治疗糖尿病性阴茎勃起功能障碍的作用机理。方法:将大鼠造成糖尿病模型后分为七组,分别是对正常组(A)、STZ组(H)、糖尿病组(B)与有阴茎勃起功能障碍的未灌注治疗药物的ED组(D)、灌注补肾中药的高剂量组(E)、低剂量组(F)、西药组(G),然后用补肾中药和西药对糖尿病性阴茎勃起功能障碍的大鼠进行治疗,治疗8周后,取材大鼠阴茎海绵体,将阴茎海绵体组织匀浆,用RT-PCR试剂盒行NOS的测量和Trizol提取mRNA的表达。收集各组细胞提取总RNA,逆转录成cDNA模板,进行RT-PCR扩增, PCR反应体系进行30个循环,总反应体系80ul。反应结束后,取反应液10ul以含溴乙锭的2%琼脂糖电泳30分钟(5V/cm),紫外分析仪上观察若在501bp处出现橙黄色条带,则为阳性标本。PCR扩增产物可-20℃冻存供以后分析使用凝胶成像系统拍照。得出数据用SPSS统计,进行各组比较。结果:糖尿病性阴茎勃起功能障碍(ED)的大鼠阴茎海绵体NOS活性降低,nNOS (神经型NOS)蛋白表达较正常组、STZ组、糖尿病组对照明显降低。而糖尿病性阴茎勃起功能障碍组与正常组、STZ组、糖尿病组相比较阴茎海绵体神经周围iNOS (诱导型NOS)蛋白表达降低。糖尿病性勃起功能障碍组的大鼠阴茎海绵体nNOS和iNOS逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),与正常组和STZ组、糖尿病组相比较其蛋白含量降低,mRNA的水平降低。得出数据分析有显著性差异(P<0.01)。结论:补肾中药能提高糖尿病性勃起功能障碍组NOS蛋白含量和mRNA的表达,对糖尿病性勃起功能障碍的治疗有一定的疗效。
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