第一部分孕鼠维生素D缺乏对子代长骨维生素D受体表达的影响目的:研究大鼠孕期维生素D缺乏对其子鼠长骨中维生素D受体(VDR)基因和蛋白表达的影响。方法:成熟雌性SD大鼠36只随机分为模型组和对照组各18只,模型组以不含维生素D的大鼠饲料避光喂养,对照组以标准饲料正常光照喂养。于分组喂养前及喂养两周后分别检测模型组和对照组雌鼠血清25-OHD3水平,确定模型的建立。然后再分别与成熟SD雄性大鼠交配,分别取孕20天(E20d)、生后1天(B1d)和生后7天(B7d)的子鼠左侧股骨。应用FQ-PCR、Western blotting检测胚胎和新生鼠长骨中VDR的表达。结果:分组喂养前,模型组血清25-OHD3值为63.46±9.65ng/ml,对照组为62.53±9.03ng/ml,模型组与对照组无差异(P>0.05);分组喂养两周后,模型组血清25-OHD3值为39.52±9.01ng/ml,对照组为65.65±11.75ng/ml,模型组雌鼠血清25-OHD3水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);VDR mRNA在三个时间点的相对表达量模型组均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);基因所对应的蛋白在三个时间点的表达量模型组亦均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:孕鼠维生素D缺乏可下调子鼠长骨中VDR的表达水平,可能为子鼠骨骼发育不良机制之一。第二部分孕鼠维生素D缺乏对子代骨发育相关基因BMP-2、Cbfal、Dmp1表达的影响目的:研究大鼠孕期维生素D缺乏对其子鼠骨发育相关基因BMP-2、Cbfa1、Dmp1表达的影响。方法:成熟雌性SD大鼠36只随机分为模型组和对照组各18只,模型组以不含维生素D的大鼠饲料避光喂养,对照组以标准饲料正常光照喂养。两周后与成熟SD雄性大鼠交配,分别取孕20天(E20d)、生后1天(B1d)和生后7天(B7d)的子鼠左侧股骨。应用FQ-PCR检测胚胎和新生鼠长骨中骨发育相关基因BMP-2、Cbfa1、Dmp1基因的表达。结果:骨发育相关基因BMP-2、Cbfa1及Dmp1 mRNA在E20d、B1d和B7d的表达,模型组均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:BMP-2、Cbfa1、Dmp1均为骨发育相关基因,孕鼠维生素D缺乏可下调子鼠长骨中BMP-2、Cbfa1、Dmp1的表达水平,从而可能影响子鼠骨骼的发育。
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