蒺藜皂苷（Gross Saponins of Tribulus Terrestris,GSTT）是从蒺藜地上全草中提取的主要有效成分,是以呋甾醇和螺甾醇皂苷为主的总皂苷。已有研究证明GSTT具有降血压、降血脂、抗凝血、改善血液流变学、减轻心肌缺血及再灌注损伤等心血管系统的作用,本课题组前期工作表明,GSTT对脑血管损伤亦有一定的保护作用。在此基础上,本实验通过建立大鼠大脑中动脉缺血-再灌注损伤模型及H2O2诱导PC12细胞氧化应激损伤模型,进一步探讨GSTT对脑缺血-再灌注损伤的保护作用及其可能的分子机制。在整体水平上,采用线栓法建立大鼠局灶性大脑中动脉缺血-再灌注模型,观察GSTT对脑缺血-再灌注损伤的保护作用。结果表明:GSTT可改善大鼠神经行为,上调脑组织ATP酶活性,缩小脑组织梗死面积,减轻脑组织病理形态学损害。在细胞水平上,采用H2O2诱导PC12细胞氧化应激损伤模型,观察GSTT对PC12细胞的抗凋亡作用。结果表明,GSTT可使流式细胞术检测的PC12细胞凋亡率降低、线粒体膜电位回升,MTT法检测线粒体活性增强,分光光度计检测SOD活性升高、MDA含量降低,且在一定范围呈剂量依赖性。倒置显微镜观察可见细胞形态学损伤明显恢复,荧光显微镜观察可见细胞核浓染致密数减少,琼脂糖凝胶电泳观察未见典型DNAladder条带。实验结果初步揭示,GSTT对脑缺血-再灌注损伤的保护作用可通过以下机制实现:GSTT改善脑组织能量代谢障碍,促进神经细胞ATP酶活性恢复,保护细胞完整性,增强机体清除自由基能力,发挥抗氧化应激作用,保护线粒体功能,抑制神经细胞凋亡。
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