目的1.建立人类唾液蛋白质组双向电泳图谱,获取人类唾液蛋白质组的生物学信息。2.用比较蛋白质组学的策略,初步研究2型糖尿病人的唾液蛋白质与正常人唾液蛋白质差异表达情况。方法1.以双向电泳技术进行唾液的蛋白质分离,质谱兼容的银染染色,获得唾液蛋白质组双向电泳图谱,用MALDI-TOF/MS获得肽指纹图谱,MS-FIT数据库进行搜索,获得有关蛋白质信息。2.以优化的2D-GE条件分离2型糖尿病患者唾液蛋白质,获取2型糖尿病患者唾液蛋白质组双向电泳图谱,利用专门的软件筛选出正常人和2型糖尿病患者的差异蛋白质。采用MALDI-TOF/MS对两组间比较所得目标蛋白质点进行质谱鉴定。结果1.以正常人唾液为研究对象,在不同的条件下进行2D-MALDI-TOF/MS的分析,建立了正常人唾液蛋白质组图谱。2.对比正常人和2型糖尿病患者的唾液差异蛋白质,选取具有明显差异的20个蛋白点进行质谱鉴定,共鉴定出7种蛋白质。结论1.建立了正常人唾液蛋白质组的双向电泳图谱,得到389±17个蛋白点。2.建立了2型糖尿病患者唾液蛋白质组的双向电泳图谱,得到403±9个蛋白点。3.鉴定出七种差异表达蛋白。2型糖尿病患者的激素原转化酶,α-3-半乳糖转移酶,醛-酮还原酶家族1,4号蛋白成分高于正常人,锌指蛋白655, Ig蛋白重链可变区,VH3家族,生育酚相关蛋白(TAP)和β-内啡肽(β-EP)比正常人低。
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