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甘肃不同生态区域苜蓿根瘤菌筛选菌株常规鉴定与分子鉴定

论文摘要

以甘肃不同区域筛选的31株苜蓿根瘤菌株和3株参比标准菌株种为研究对象,进行常规鉴定和16S rDNA序列分析。研究结果如下:(1)在综合菌落形成时间和根瘤菌代时,研究发现:供试菌株全部为快生型根瘤菌,本试验选择中华根瘤菌属菌株CK1.2531(sinorhizbium melilotii),CK1.2545 (sinorhizbium fredii),CK1.2547 (sinorhizbium medicar)快生型参比标准菌株作对照。(2)表型聚类结果可以得出:所有供试菌株与参比标准菌株若以遗传距离的远近为分类界限,它们可以分为Ⅰ和Ⅱ两大类群:第Ⅰ类群由五个亚类组成,亚类1有14个菌株,还包括CK1.2545(sinorhizbium fredii),亚群2有5个菌株,亚类3由GL24、GL16,与CK1.2547(sinorhizbium medicar)可聚为一类。QA33B、WA62A、WA24为亚类4,亚类5有7个菌株包括CK1.2531(sinorhizbium melilotii)。第Ⅱ类只有一个菌株GA26。(3)通过对表型聚类图,挑选四个代表根瘤菌菌株通过16SrDNA序列同源性比较和系统发育分析,结果表明:四个代表供试根瘤菌菌株可分为2个属,鉴定菌株QA46A、WA24和WL47为中华根瘤菌属(Sinorhizobium sp),GA26是根瘤菌属(Rhizobium sp)种或其变种菌株,与表型聚类的结果保持了较高的一致性。(4)本研究通过对菌落形态、生理生化特性的测定,结合其16S rDNA部分序列分析研究。GA66、QA46A、WL53、QA50A、DA99、GL21、DL81、QL36B、TL18、GL65、DL67、TA34、DL15、QL31B,能与CK1.2545聚为一类,是费氏中华根瘤菌(sinorhizbium fredii) ; DL58、TL22A、TL47、WA32、DA10聚为一类,是Sinorhizobium xinjiangense;GL24、GL16的遗传距离较近,与CK1.2547(sinorhizbium medicar)可聚为一类,判断为sinorhizbium medicar;根据其遗传距离,苜蓿中华根瘤菌(sinorhizbium melilotii)包括GA28、QL20B、DA42、DA53、WL47、WL68、QA33B、WA62A和WA24;GA26是根瘤菌属(Rhizobium sp)种或其变种菌株。

论文目录

  • 缩略词（ABBREVIATION）
  • 摘要
  • SUMMARY
  • 第一章 文献综述
  • 1 苜蓿固氮的意义及根瘤菌研究概况
  • 1.1 苜蓿固氮的意义
  • 1.2 根瘤菌的发现及应用
  • 1.3 根瘤菌的形态与生理特性
  • 1.4 根瘤菌的分类研究进展
  • 2 分子鉴定研究方法
  • 3 根瘤菌鉴定的研究理论、方法及应用
  • 第二章 材料和方法
  • 1 供试材料
  • 1.1 供试材料寄主地点简介
  • 1.2 主要试验仪器
  • 2 方法
  • 2.1 形体特征观察
  • 2.2 生理生化性状
  • 2.3 分子鉴定
  • 第三章 结果与分析
  • 1 根瘤菌常规鉴定结果
  • 1.1 根瘤菌的形态观察
  • 1.2 生理生化性状测定结果
  • 1.3 表型性状聚类分析
  • 2 根瘤菌分子鉴定结果
  • 2.1 根瘤菌基因组DNA
  • 2.2 PCR 产物检测
  • 2.3 16S rDNA 序列测定及系统发育学地位的确定
  • 2.4 根瘤菌鉴定结果
  • 3 小结
  • 第四章 讨论和结论
  • 1. 讨论
  • 2. 结论
  • 参考文献
  • 附录
  • 致谢
  • 导师简介
  • 个人简介

    • 相关论文文献

    本文来源: https://www.lw50.cn/article/710b2f331cfc699d62824f64.html