目的原发性肝细胞癌(Primary hepatocellular carcinoma, HCC)简称肝癌,是我国最常见的恶性肿瘤之一,恶性程度高,死亡率高,预后差,且发病率有上升的趋势。以手术为主的个体化综合治疗已成为目前肝癌治疗的规范化治疗方案,化疗是目前治疗肝癌的主要辅助手段之一。尽管新的抗癌药物及化疗方案不断推出,但治疗效果仍无显著提高。其主要原因是癌细胞对化疗药物产生了多药耐药(multidrug resistance, MDR),即对一种药物耐药的癌细胞同时对另一些与之化学结构、作用机制完全不同的药物产生交叉耐药。因此,MDR是当前肿瘤化疗治疗中急待解决的问题。本研究目的在于建立人肝癌多药耐药细胞系HepG2/ADM和其亲本细胞系HepG2蛋白质双向电泳图谱,并分析两者之间蛋白质表达差异和特点。方法采用MTT法检测HepG2/ADM和HepG2细胞对不同化疗药物的敏感性,利用双向电泳技术分离HepG2/ADM和HepG2细胞的总蛋白质,凝胶银染后,用ImageMaster 2D Platinum软件分析两者之间的差异蛋白。结果相对于正常HepG2细胞,HepG2/ADM细胞表现出明显的多药耐药;HepG2/ADM和HepG2细胞的蛋白质点在双向电泳图谱上的分布模式基本一致;识别了45个在两株细胞之间差异表达的蛋白质点,HepG2/ADM细胞有25个蛋白点表达上调,9个蛋白点表达下调,7个蛋白点在HepG2/ADM细胞特异表达,4个蛋白点在HepG2细胞特异表达。结论初步建立了分辨率较高、重复性较好的HepG2/ADM和HepG2细胞总蛋白质双向电泳图谱,两者之间存在一些差异表达蛋白,为进一步使用蛋白质组学方法研究肝癌多药耐药奠定了良好基础。
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