目的：研究细胞凋亡信号调节激酶1（apoptosis signal-regulating kinase 1，ASK1）介导的丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）信号转导通路在脊髓缺血再灌注损伤中的作用，并从分子水平初步探讨脊髓缺血再灌注中ASK1的活化机制。方法：20只新西兰大白兔随机分为对照组、缺血30分钟／再灌注15分钟组、缺血30分钟／再灌注1小时组、缺血30分钟／再灌注24小时组，应用腹主动脉阻断法制作兔脊髓缺血再灌注损伤模型。光学显微镜及电子显微镜观察脊髓形态学变化；Western blot检测脊髓蛋白中细胞凋亡信号调节激酶1（apoptosis signal-regulating kinase 1，ASK1）、c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase，JNK）、p38的表达及活化；免疫共沉淀法（immunoprecipitation，IP）分析ASK1与14-3-3蛋白间的结合与分离；免疫组织化学染色（immunohistochemistry）法测定活化的ASK1（phospho-ASK1，pASK1）及14-3-3在神经细胞内的定位表达。结果：与对照组相比，HE染色显示缺血30分钟／再灌注15分钟脊髓组织、神经细胞无明显异常，而缺血30分钟／再灌注1小时及24小时脊髓间质片状出血，神经细胞明显肿胀；电子显微镜观察显示对照组及缺血30分钟／再灌注15分钟神经细胞形态正常，而缺血30分钟／再灌注1小时及24小时神经细胞核浓缩、染色质聚边、髓质脱髓鞘；Western blot显示ASK1及其下游蛋白JNK、p38在脊髓缺血30分钟／再灌注1小时及再灌注24小时实验组显著活化；免疫共沉淀显示ASK1活化时，14-3-3与ASK1发生蛋白分离；免疫组织化学染色提示脊髓缺血再灌注时，pASK1及14-3-3在神经细胞浆内的定位发生改变，两者存在分离现象。结论：通过ASK1介导的MAPK信号转导途径参与脊髓缺血再灌注的损伤过程；14-3-3蛋白与ASK1的分离导致ASK1活化，进一步导致下游JNK和p38的活化，从而引起凋亡信号的传递，是脊髓缺血再灌注损伤的分子机制之一。
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