人内皮抑素基因的克隆、重组表达、纯化和活性研究

论文摘要

研究背景子宫内膜异位症（Endometriosis,简称内异症）是一种育龄妇女的常见病,发病率逐年上升,已达10%-15%,35%-50%的不孕妇女患有该病,由其引起的痛经、不孕、性交疼痛等症状严重影响着妇女的生活质量。内异症真正的病因和发病机制尚不明确。现有的治疗方法局限于激素类药物、手术或手术联合药物等,虽对缓解症状,提高妊娠率有一定帮助,但疗效有限,副作用大,复发率高。近年来的研究表明,脱落的子宫内膜附着在腹膜或其它部位时,异位内膜本身及其周围组织新的血供的建立和维持,是异位内膜种植存活和子宫内膜异位症发生的基本条件。血管生成机制已成为内异症公认的重要发病机制之一。因此,从血管生成理论出发,寻找内异症新的治疗途径,降低内异症复发和减少毒副作用已成为临床的迫切需要。内皮抑素作为目前已知最强的内源性血管形成抑制因子,在肿瘤的治疗方面已有大量研究及应用,但在内异症的治疗研究领域鲜有报道。目的本研究旨在通过分子生物学技术,从胎肝组织克隆人内皮抑素基因,在大肠杆菌中表达,纯化后得到有生物学活性的重组蛋白质产物,为后续的动物实验奠定基础。方法与结果 1.采用RT-PCR技术从胎肝中克隆人内皮抑素基因全序列,构建人内皮抑素

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摘要

Abstract

前言

第一章人内皮抑素基因的克隆及序列测定

1.1 材料与方法

1.1.1 材料

1.1.2 方法

1.2 结果

1.3 讨论

1.4 小结

第二章 pBV220-Human Endostatin非融合表达载体的构建、表达和纯化

2.1 材料与方法

2.1.1 材料

2.1.2 方法

2.2 结果

2.3 讨论

2.4 小结

第三章 pTRX-Human Endostatin融合表达载体的构建、表达和纯化

3.1 材料与方法

3.1.1 材料

3.1.2 方法

3.2 结果与分析

3.3 讨论

3.4 小结

第四章重组蛋白Human Endostatin的活性研究

4.1 材料与方法

4.1.1 材料

4.1.2 方法

4.2 结果与分析

4.3 讨论

4.4 小结

总结与展望

参考文献

附录

攻读学位期间成果

致谢

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人内皮抑素基因的克隆、重组表达、纯化和活性研究

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