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柽柳金属硫蛋白基因（MT）的功能验证及转MT基因山新杨的获得

论文摘要

将柽柳（Tamarix. Sp）金属硫蛋白基因（MT1）插入到植物表达载体pBI121中,利用农杆菌（Agrobactrium tumefaciens）介导法将MT1基因导入烟草基因组,培育转基因烟草。转基因烟草T1代植株的卡那霉素抗性分析表明,多数转基因植株后代表现为3:1的分离比例,少数转基因植株的抗性分离表现为15:1或不符合孟德尔遗传分离比例。说明整合到烟草基因组的外源基因多为单拷贝基因,少数为多拷贝基因。对分离比为3:1的卡那霉素抗性植株进行PCR、PCR-Southern检测和Northern杂交分析证明:MT1基因已经整合到烟草基因组中,并且可以通过有性生殖传递给后代;外源MT1基因的转基因后代中能继续表达,但不同株系的外源基因表达水平不尽相同,T1-1和T1-6的外源基因表达量较高,T1-3和T1-8的外源基因表达量较低。分析非转基因烟草株系和4个转MT1基因烟草株系T1代在CdCl2和NaCl胁迫条件下,株高、鲜重、超氧化物歧化酶（SOD）活性、过氧化物酶（POD）活性、丙二醛（MDA）含量、叶绿素含量等生长性状和生理特性的变化情况表明:非转基因烟草株系和转MT1基因烟草株系在CdCl2和NaCl胁迫下,生长性状和生理特性表现出相似的变化趋势。但转基因植株的株高、鲜重、叶绿素含量、POD活性、SOD活性等均比非转基因株系明显增加;MDA含量比非转基因株系明显降低。用同样的方法将MT1导入杨树基因组中,对转基因杨树进行了PCR、PCR-Southern检测,初步证明MT1整合到杨树基因组中。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 第一章 文献综述
  • 1.1 重金属污染对植物毒害作用研究进展
  • 1.2 植物对重金属的保护防御机制
  • 1.3 植物金属硫蛋白的研究进展
  • 1.4 杨树简述
  • 1.5 本项研究的目的和意义
  • 1基因植物表达载体构建及对烟草的遗传转化'>第二章 MT1基因植物表达载体构建及对烟草的遗传转化
  • 2.1 实验材料
  • 2.2 实验方法
  • 2.3 金属硫蛋白酶基因烟草的遗传转化
  • 2.4 结果与分析
  • 2.5 小结
  • 第三章 分子检测
  • 3.1 实验材料
  • 3.2 实验方法
  • 3.3 结果与分析
  • 3.4 本章小结
  • 1基因的功能验证'>第四章 MT1基因的功能验证
  • 4.1 实验材料
  • 4.2 实验方法
  • 4.3 结果与分析
  • 4.4 本章小结
  • 1基因对山新杨的遗传转化和初步检测'>第五章 山新杨（P.davidiana×P.bolleana）优化体系建立及 MT1基因对山新杨的遗传转化和初步检测
  • 5.1 实验材料
  • 5.2 实验方法
  • 5.3 结果与分析
  • 5.4 本章小结
  • 第六章 讨论
  • 6.1 柽柳MT 基因可提高烟草的抗重金属性和耐盐性
  • 6.2 转MT 基因烟草对重金属、盐胁迫下生理生化的反应
  • 6.3 转MT 基因烟草子一代遗传稳定性分析
  • 6.4 外源基因表达与转MT 基因烟草抗逆相关性
  • 6.5 植物体抗性机制的交叉性
  • 6.6 关于杨树的遗传转化
  • 第七章 结论
  • 参考文献
  • 致谢
  • 附录
  • 作者简历
  • 硕士生期间发表或待发表的论文

    • 相关论文文献

    本文来源: https://www.lw50.cn/article/7ab2751a677f172676abaea0.html