凝血系统疾病死亡率高,危害大,愈来愈受到关注。目前我国每年至少约有500万此类患者需要治疗。蛇毒作为临床制剂与同类制剂相比,具有疗效良好,无严重副作用等特点,因此在临床治疗上有很好的发展前景。国内关于蛇毒酶的利用多侧重于单一酶的研究,不能有效的开发利用蛇毒,造成了原料的浪费。因而,充分利用蛇毒,提高蛇毒制剂的产量,降低生产成本,是蛇毒开发利用急需解决得问题。本实验以蛇毒为研究对象,粗毒分别通过三步和五步柱层析,得到类凝血酶和凝血因子X激活剂两种活性组分;最后对层析后的活性组分进行纯度检测,SDS-PAGE图谱上均显示单一条带,类凝血酶分子量为36.1kD,凝血因子X激活剂分子量为41.4kD;经等电聚焦法测定类凝血酶和凝血因子X激活剂分别为4.42和4.00;糖蛋白染色结果揭示都是糖蛋白。本文通过大量的文献研究,仔细研究对比类凝血酶和凝血因子X激活剂的各种分离纯化方法,简化实验步骤,分别分离纯化了两种酶。在蛇毒的分离纯化过程中,同时得到了两种酶,比较充分地利用了蛇毒,为进一步开发利用蛇毒探索了一条有效的途径。
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