目的研究人类巨细胞病毒（human cytomegalovirus，HCMV）感染对人胚肺成纤维（human embryonic lung fibroblastic，HEL）细胞的MCM装载因子Cdc6与Cdt1表达的影响，从分子水平上探讨HCMV的发病机制。方法用血清饥饿法同步化HEL细胞于G0／G1期，流式细胞术测细胞周期；用HCMV感染同步化的HEL细胞作为感染组，同时设模拟感染组为对照组。用倒置相差显微镜观察两组细胞形态改变至感染后7天。于感染后12h（hour）、24h、48h、72h和96h收获细胞，提取总的RNA，采用半定量逆转录—聚合酶链反应（RT—PCR）技术检测Cdc6 mRNA的表达水平；用免疫细胞化学法检测两组细胞核内HCMV Cdt1蛋白。结果1．模拟感染组未见细胞形态学改变，感染组感染后36h HEL细胞有形态学的改变即可见局部HEL细胞变圆、胞体变大、膨胀，7天时形态学的改变更加明显，所有细胞均发生病变。2．12h、24h、48h、72h和96h两组HEL细胞Cdc6 mRNA表达水平均有显著性差异（P＜0.05），12h、24h和48h时感染组较模拟感染组明显增加，72h和96h时模拟感染组较感染组明显升高。感染组在感染后12h时Cdc6 mRNA表达水平最高，后逐渐下降，至72h时达最低水平，96h时又稍有回升；模拟感染组在感染12h时Cdc6mRNA表达水平最高，后逐渐下降，至48h时达最低水平，72h时后开始回升，96h时继续回升。3．12h、24h、和96h两组HEL细胞Cdt1蛋白水平均有显著性差异（P＜0.05），而48h、72h两组HEL细胞Cdt1蛋白水平无明显差异（P＞0.05）。12h和96h时感染组较模拟感染组明显降低，24h感染组较模拟感染组明显升高。模拟感染组在感染后12h时Cdt1蛋白表达水平最高，后逐渐下降，至24h时达最低水平，96h又稍有回升；感染组在感染后12h Cdt1蛋白表达水平较低，24h达到最高峰，48h时急剧下降，一直维持较低的稳定水平。结论1．HCMV诱导Cdc6 mRNA过度表达，导致Cdc6的积聚，最终将影响细胞周期的进程。2．HCMV诱导Cdt1蛋白表达延迟，从而影响了MCM复合物的装载和pre-RC的形成，使细胞停滞在G1期，阻止DNA的复制。
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