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胰腺癌相关蛋白的筛查及验证

论文摘要

胰腺癌的死亡率较高,而且发病率逐年上升,迫切需要胰腺癌早期诊断的分子标志物和新的治疗靶点的发现。本实验利用蛋白质组学技术对胰腺导管腺癌组织标本进行研究,望获得监测胰腺癌转归、判定其预后、治疗胰腺癌甚至用于早期诊断的标志物的候选物。应用二维凝胶电泳技术对14例胰腺腺癌患者的癌组织和相对应的癌旁组织进行蛋白表达差异谱的分析,针对表达有差异的蛋白点采用基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱仪进行鉴定,运用Western blotting技术对表达有明显差异、并且可能分泌进入体液的蛋白质进行进一步研究。二维凝胶电泳结果显示:胰腺癌组织与癌旁组织间有48个差异点,其中有8个胶点上调,40个胶点下调,经质谱鉴定得到了28个蛋白,上调的有6个,下调的有22个。它们主要属于转录调节类、信号转导蛋白类、抗氧化蛋白类、酶调节蛋白类、催化功能类和结合功能类蛋白。Western blotting实验结果显示:peroxiredoxin 2、carboxypeptidase B和trypsin 1在胰腺癌癌组织中的表达量与癌旁组织相比明显下调。Peroxiredoxin 2、carboxypeptidase B和trypsin 1等胰腺癌相关蛋白表达下调,其功能主要是通过细胞氧化损伤、降解细胞外基质和促进新生血管生成等作用促进胰腺癌的形成和转移。因此,这些蛋白有可能成为胰腺癌临床诊断、预后、疗效评估的蛋白分子标志物。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 目录
  • 前言
  • 实验材料
  • 1.仪器设备
  • 2.器械及材料
  • 实验方法
  • 1.样本收集
  • 2.溶液配制
  • 3.样品处理
  • 4.蛋白浓度测定
  • 5.二维凝胶电泳
  • 6.凝胶扫描
  • 7.胶图分析
  • 8.质谱鉴定
  • 9.Western blotting
  • 实验结果
  • 1.二维凝胶电泳条件优化
  • 2.二维凝胶电泳图谱分析结果
  • 3.质谱鉴定结果
  • 4.Western blotting分析结果
  • 讨论
  • 1 二维凝胶电泳和质谱鉴定结果
  • 2 差异蛋白功能
  • 结论
  • 参考文献
  • 附录1:实验数据
  • 附录2:缩略语表
  • 附录3:蛋白质准确定量——积层胶蛋白定量方法研究
  • 参加会议
  • 致谢
  • 相关论文文献

    本文来源: https://www.lw50.cn/article/91ce0483d4909d49918a0df0.html