黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus（Fisch.）Bge.var.mongholicus（Bge.）Hsiao或膜荚黄芪A.membranaceus（Fisch.）Bge.的干燥根,主要含皂苷类、黄酮类、多糖类及氨基酸类等。屠鹏飞等从黄芪中分离得到32种化合物,包括4种异黄酮、毛蕊异黄酮,2种异黄烷,1种紫檀烷,黄芪甲苷等。黄芪总皂苷具有免疫调节、清除多种自由基等作用,其中黄芪甲苷为主要有效成分,具有抗应激、抗生物氧化、抗炎、利尿、强心、提高肌体免疫等功效。本课题在以往黄芪总皂苷含量测定方法研究的基础上,对总皂苷的树脂分离方法进行研究并建立了合理的比色法含量测定方法,同时在此基础上进一步对黄芪总皂苷进行纯化。利用氨试液水解法将黄芪药材中其它皂苷类成分转化为生物活性较强的黄芪甲苷,既简化了黄芪甲苷的含量测定步骤,又大幅提高了其含量。酶解辅助提取技术是近年来用于天然植物有效成分提取的一种先进技术,可温和分解植物细胞组织,加速有效成分溶出,从而提高其提取率。本文选用适宜的植物酶用于黄芪皂苷的提取,在原提取工艺前加入酶解步骤,以期达到提高提取率、缩短时间、减少能耗的目的,为合理充分利用中药材资源及工业生产提供理论依据。本文通过对香草醛浓度、加热时间、加热温度、冰浴时间等黄芪总皂苷比色法含量测定中各因素的考察建立了合理的比色方法并作了方法学考察。通过氨试液水解法单因素考察试验,确定最佳氨解工艺为:浓氨试液与药材配比为1:5,氨试液浓度占药材提取液2%时,于90℃水浴回流2 h,验证试验及方法学考察均合格。比色法结果表明,氨解前后总皂苷含量无统计学差异,但氨解后黄芪甲苷含量约是氨解前的16倍。选用正交试验确定纤维素酶最佳酶解条件为:45℃、pH 4.5条件下,用占药材质量0.7%的纤维素酶酶解药材2.0 h,与原醇提取法相比总皂苷含量提高约48%。用木聚糖酶1.0%在同样条件下酶解,与原醇提取法相比可使总皂苷含量提高约41%。以AB-8型大孔吸附树脂纯化黄芪醇提取液,将多糖类大极性物质与皂苷类分离开,确定4倍树脂体积80%乙醇为最佳洗脱剂。将醇洗脱液继续上ADS-22型极性吸附树脂,经过水、30%乙醇洗脱,可将皂苷类进一步纯化,纯度为20.30%。此项研究还有待进一步深入。
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