去铁胺联合高三尖杉酯碱对K562细胞株体外凋亡及细胞周期的影响

论文摘要

目的:探讨去铁胺（Deferoxamine,DFO）对人慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞凋亡和细胞周期的影响。方法:采用MTT比色法观察DFO、高三尖杉酯碱（Homoharringtonine,HHT）单用及两者合用对体外培养的K562细胞凋亡的影响。采用HE染色、荧光染色观察用药后细胞形态,用流式细胞仪（Fluorescence Activated Cell Sorter,FACS）检测细胞凋亡率及细胞周期。结果:①MTT比色法测定显示DFO能抑制K562细胞增殖,呈剂量依赖性和时间依赖性。②DFO与HHT有明显的协同作用。用金氏公式判定50、100、200μmol/L DFO与0.05μg/ml HHT有协同抑制增殖作用。③流式细胞仪分析,DFO处理组出现一特征性的亚二倍体凋亡峰。其凋亡率呈时间、剂量依赖性。联合用药时,凋亡率高于单独用药组。④流式细胞术发现单用DFO可使K562细胞阻滞于G0/G1期,其阻滞细胞的数量与药物浓度呈正相关,以作用36小时对细胞周期的阻滞作用最强。联合用药时,细胞周期阻滞作用明显。结论:①DFO能有效地抑制人慢性粒细胞白血病细胞K562细胞增殖,其抗增殖作用具有时间、剂量依赖性。②DFO可体外诱导K562细胞凋亡,并使细胞周期阻滞于G0/G1期。因此,阻滞细胞周期作用可能是DFO抗肿瘤的一个重要机制。③DFO与HHT联合对K562细胞具有抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡协同作用。

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第一章前言

第二章实验材料与方法

2.1 实验材料与试剂

2.1.1 实验对象

2.1.2 药物及试剂

2.1.3 主要仪器

2.2 实验方法

2.2.1 细胞培养

2.2.2 实验步骤

2.2.2.1 细胞生长抑制测定

2.2.2.2 细胞形态及凋亡检测

2.2.2.2.1 实验分组

2.2.2.2.2 制片

2.2.2.2.3 H E染色

2.2.2.2.4 荧光染色

2.2.2.2.5 流式细胞仪测定

2.3 数据的统计学处理

第三章结果

3.1 MTT比色法检测细胞抑制率

3.2 流式细胞仪检测结果

3.3 DFO作用后K562细胞形态学改变

附图

第四章讨论

第五章结论

参考文献

致谢

综述

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