皮肤位于机体外环境和内环境的界面上,是机体重要的屏障保护器官,其表皮绝大部分由角质形成细胞（KC）组成。在皮肤上皮化中,蛋白酶是一类重要的调节分子。PAI-3 又称为蛋白C 抑制剂（protin C inhibitor PCI）,是纤溶酶原激活剂及其抑制剂（Plasminogen Activator/ Plasminogen Activator inhibitor,PA/PAI）系统的重要成员。新近的研究表明:PAI-3 在人的肝脏、胰腺、泌尿生殖系统、血小板等多个器官和组织中表达,在凝血、纤溶、细胞迁移、生殖及肿瘤侵袭转移中具有重要作用。然而PAI-3 是否参与人的皮肤上皮化,目前国内外尚未见报道。本实验旨在研究正常成人皮肤组织及培养分化KC 中和胚胎生长发育过程表皮KC 中的PAI-3 的表达及作用,希望有助于阐明PAI-3 在皮肤上皮化中的功能,为进一步研究PAI-3 在皮肤上皮化中的机制及各种皮肤疾病提供实验基础。方法: 采用免疫组织化学（Immunohistochemistry,IHC）、（Immunocytochemistry,ICC）和逆转录-聚合酶链反应（reverse transcription PCR,RT-PCR ） 技术及KC角质壳的提取,从三个方面研究了PAI-3 在人皮肤上皮化中的表达及作用。首先对PAI-3 在正常成人皮肤组织中的表达及作用进行初步研究后,在高钙条件下培养的分化KC 中的表达及作用进行了探讨,最后对其在胚胎生长发育过程皮肤表皮KC 中的表达进行了检测。结果: 1、PAI-3 在正常成人皮肤组织中表达,并且主要位于分化程度较高的KCs中。2、PAI-3 存在终末分化KCs 角质壳中。3、PAI-3 蛋白及基因的转录在分化KC 中表达,并随着分化的增加,表达增强,但在后期,其蛋白表达及基因的转录开始降低。4、PAI-3 蛋白在增殖KC 中主要聚集在细胞核膜周围,而在分化KC 中主要位于细胞的胞浆中。5、PAI-3 蛋白在人胚胎主要位于分化较高的表皮KC 中,并且随着胚胎的生长发育,其表达增强,表达的高峰在中期,晚期表达开始降低。6、PAI-3 基因的转录随着人胚胎的生长发育,其表达增强,表达的高峰在中期,但在晚期仍然维持在较高的水平。结论: 1、PAI-3 在人皮肤表皮组织中表达,且主要位于分化程度较高的表皮KC 中,其存在终末分化KCs 角质壳中。2、随着KC 的分化,PAI-3 蛋白及基因转录增强,并且由核膜向胞浆转移。
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