人类基因组计划的顺利实施使大规模的基因功能研究真正成为生命科学研究的热点,利用结构基因组学所提供的信息和材料研究基因的功能将成为生命科学研究的主要技术特征。功能基因组学的研究在极大的程度上依赖于对模式生物的研究,因此,利用基因打靶技术建立各类遗传修饰动物模型将成为“后基因组”时代进行功能基因组学研究的重要平台技术。 基因打靶(gene targeting)技术是一种改变生物活体遗传信息的实验手段,是根据同源重组原理建立和发展起来的。在酵母系统中,天然同源重组概率较高,而在哺乳动物细胞和多数原核生物中获得重组体的概率极低,以基因定向敲入(敲出)的Cre/LoxP系统为例,在基因定向打靶过程中,通过分子重组将LoxP序列和目的(替代)基因序列引入模式动物胚胎干细胞的染色体中,是整个基因打靶技术中的核心环节,其效率极低,因此,获得成功的重组体概率也极低,使后续的筛选工作既耗时又耗力,严重地制约了基因打靶技术在生命科学研究中的广泛应用。因此,获取一种同源高效率重组过程的方法成为基因打靶技术研究中迫切需要解决的问题和新的研究亮点。 近年来的研究发现,在原核生物中,来源于λ噬菌体的Red重组系统在大肠杆菌中具有高效率的同源重组功能。如果将这套系统引入真核基因的基因打靶技术中加速目的基因的分子重组过程,可显著地缩短基因打
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