随着我国罗非鱼产量的逐年增加,开展罗非鱼的增值加工显得日益迫切。本研究以罗非鱼肉的酶解物为原料,探讨利用树脂分离其酶解液中低聚肽的可行性,从而提高罗非鱼的附加值,并降低低聚肽的生产成本,以便于其产业化,满足人们对保健低聚肽产品的需求。主要结果如下:(1)罗非鱼酶解工艺:底物浓度(煮熟鱼糜)5%,Alcalase酶添加量为2300μ/g.鱼蛋白,在pH=8.0,55℃下反应4h后,灭酶,离心(过滤),得上清液。在此条件下,可获得平均水解度为17.86%的酶解液。(2)酶解液中游离氨基酸的脱除:采用阳离子交换树脂732分离酶解液中的游离氨基酸及低聚肽,具体工艺为:料液pH为3.0,室温下以流速1mL/min上柱;用1mol/L NaOH溶液洗脱,洗脱速度为1mL/min。残余蛋白(多肽)、氨基酸含量、平均水解度及离子色谱结果表明,阳离子交换树脂能有效吸附氨基酸,吸附率为82.16%,但对残余蛋白(多肽)吸附少,吸附率仅为36.30%,且平均水解度无显著变化;1mol/L NaOH溶液除能洗脱游离氨基酸外,还能洗脱碱性氨基酸比例大的小分子低聚肽,洗脱率为78.07%。(3)低聚肽的分离:静态交换实验表明,大孔树脂AB-8能有效吸附低聚肽。通过紫外特征吸收、氨基氮含量、平均水解度、平均肽链长度变化、F值及离子色谱,确定其最佳柱层析工艺为:料液直接上柱,流速1mL/min;采用5%乙醇溶液洗脱,洗脱流速为1mL/min;在此条件下,可获得平均肽链长度分别为1.18~6.43的低聚肽。产物的紫外吸收图谱、离子色谱图和氨基酸自动分析结果表明,产物氨基酸种类较多,表明获得的低聚肽为多种低聚肽的混合物,需进一步分离纯化。
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