Ghrelin和生长激素释放因子GRF(Growth Hormone Releasing Factor,GRF)都能够刺激机体分泌生长激素(GH),本课题构建了同时包括Ghrelin与GRF两种基因的表达载体,以PLGA为材料包裹质粒注射小鼠,研究比较Ghrelin与GRF协同作用对动物生长的影响,二者对提高动物的生长速度和畜牧业的发展具有重要意义。本研究人工合成了Ghrelin基因,在两端分别引入BamH I和EcoRI酶切位点构建了pcDNA3.1(-)-Ghrelin真核表达载体,同时又构建了pcDNA3.1(-)-GRF真核表达载体,两种真核表达载体在CHO细胞瞬时表达,经RT-PCR、检测结果阳性,同时证明表达产物具有促进IGF-1的分泌作用;以PLGA为载体,采用复乳-液中蒸发法制备了重组质粒微球,给小鼠肌注质粒微球结果表明,实验组动物累积增重与生理盐水组比差异显著,GRF和Ghrelin两种质粒微球组促生长效果优于单个质粒微球组,同时血清中IGF-1和GH的浓度也高于生理盐水组和单质粒组。本研究表明,PLGA介导的pcDNA3.1(-)-Ghrelin和pcDNA3.1(-)- GRF真核表达载体对动物有很好的促生长作用,并且两种质粒微球共同作用比单个质粒对小鼠促生长作用更为明显,体现出Ghrelin基因和GRF基因在动物促生长方面有一定的协同作用。
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