肾阳虚小鼠睾丸生殖细胞凋亡的实验研究
论文摘要
目的:探讨“房室不节、劳倦过度”所致肾阳虚小鼠生殖细胞的凋亡机制,同时,研究金匮肾气丸抑制生殖细胞凋亡的作用机理。方法:以已经建立的“房室不节、劳倦过度”肾小虚小鼠为实验动物,对小鼠睾丸组织的形态学进行观察,并分析小鼠睾丸内FSH和睾酮含量,同时利用RT-PCR和免疫组织化学技术对凋亡相关基因进行分析,利用TUNEL对小鼠睾丸生殖细胞的凋亡率进行测定。结果:“劳倦过度、房室不节”导致小鼠的睾丸内生殖细胞凋亡率上升,睾丸内睾酮含量、Fas、FasL及Caspase3表达和分布异常,金匮肾气丸和甲基睾酮对这种异常有一定反向调节作用。此外,模型小鼠的Bcl-XL mRNA水平也低于正常水平。结论:“劳倦过度、房室不节”导致小鼠睾丸内睾酮水平下降,通过Fas、FasL的外源性死亡通路引起生殖细胞凋亡,在这一过程中,有Bcl-XL的参与。金匮肾气丸可以通过提高睾丸内睾酮含量,调节Fas、Fas L表达,可以降低“劳倦过度、房室不节”造成的小鼠睾丸生殖细胞凋亡。
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提要Abstract引言正文1 实验材料1.1 实验动物1.2 药物与试剂1.3 主要仪器2 实验方法2.1 "劳倦过度、房事不节"肾阳虚小鼠模型的复制2.2 睾丸组织苏木精-伊红染色观察2.3 睾丸组织超微结构的透射电子显微镜观察2.4 睾丸组织FSH和T的放射免疫分析2.5 小鼠睾丸组织内凋亡相关基因(Fas、FasL、P53、Bcl-2、Bax、Bcl-XL)表达的RT-PCR检测2.6 睾丸组织Fas、FasL、 Caspase3的免疫组织化学染色2.7 睾丸组织凋亡细胞原位末端标记(TUNEL)3 实验结果3.1 睾丸组织苏木精-伊红染色观察结果3.2 睾丸组织超微结构的透射电子显微镜观察结果3.3 睾丸组织内FSH和T的放射免疫分析结果3.4 小鼠睾丸组织内凋亡相关基因(Fas、 FasL、 P53、 Bcl-2、 Bax、 Bcl-XL)表达的RT-PCR检测结果3.5 睾丸组织Fas、 FasL、 Caspase3的免疫组织化学染色结果3.6 睾丸组织凋亡细胞原位末端标记(TUNEL)实验结果4 讨论4.1 祖国医学对肾与男性生殖关系的认识4.2 肾阳虚证与男性生殖的现代研究4.3 常用肾阳虚动物模型复制方法4.4 "劳倦过度、房室不节"肾阳虚模型与精子发生的激素调节4.5 "劳倦过度、房室不节"肾阳虚模型与睾丸组织的细胞凋亡结语参考文献附录致谢查新报告论文著作科研课题
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