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猪链球菌2型mrp截断基因表达及其生物学活性研究

论文摘要

溶菌酶释放蛋白(MRP)是猪链球菌2型重要的毒力因子,为了研究猪链球菌2型MRP的功能片段,本实验经PCR扩增了致病性较强的国内标准株CVCC606及致病性较弱的四川分离株SC-3的mrp截断基因(tmrp),比较该段序列的差异;将CVCC606的tmrp插入pGEX-3x质粒,转化大肠杆菌,IPTG诱导表达,经谷胱甘肽亲和层析纯化GST-TMRP,测定其对BALB/c小鼠抗CVCC606感染的免疫保护性;本实验利用Xa因子切除GST,纯化MRP蛋白片段(TMRP),研究了TMRP介导的CVCC606对猪肾细胞(PK15)的黏附活性。结果表明,两株菌的tmrp基因序列同源性达99.85%,tmrp基因编码的氨基酸序列同源性100%,证实tmrp与SS2致病性差异无相关性;GST-TMRP对BALB/c小鼠抗CVCC606感染的免疫保护率为60%;TMRP蛋白与CVCC606对PK15的黏附活性显著相关,有可能包含MRP的黏附活性功能表位,是MRP的黏附功能片段。

论文目录

  • 内容提要
  • 英文缩写词表
  • 引言
  • 第一篇 文献综述
  • 第一章 猪链球菌2型的研究进展
  • 第二篇 研究内容
  • 第一章 猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白截短基因的克隆和序列分析
  • 1 材料和方法
  • 2 结果
  • 3 讨论
  • 4 小结
  • 第二章 GST-TMRP融合蛋白的原核表达及其免疫原性研究
  • 1 材料与方法
  • 2 结果
  • 3 讨论
  • 4 小结
  • 第三章 TMRP蛋白纯化及其黏附活性研究
  • 1 材料和方法
  • 2 结果
  • 3 讨论
  • 4 小结
  • 结论
  • 参考文献
  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 导师及作者简介
  • 致谢
  • 相关论文文献

    本文来源: https://www.lw50.cn/article/adccfd70f21e44975e8ae9c4.html