尼卡巴嗪(Nicarbazin)是一种广谱抗球虫药物。我国规定尼卡巴嗪在鸡组织中的残留标示物为4,4’-二硝基均二苯脲(DNC),最大残留限量为200μg/kg。本研究建立了鸡组织(肌肉、肝脏、肾脏)中尼卡巴嗪残留的高效液相色谱检测方法,并对其在鸡体内的残留消除规律进行了研究。鸡组织样品经乙腈提取,正己烷液-液萃取,碱性氧化铝小柱固相萃取净化,三氯甲烷淋洗后以甲醇-乙腈(90/10, v/v)洗脱,洗脱液浓缩后用适量流动相溶解,过滤。选用ODS高效液相色谱柱进行色谱分析,流动相为乙腈-水(50/50, v/v),紫外检测波长340 nm。DNC标准品工作液在0.0450.0 mg/L浓度范围内线性关系良好(r = 0.9999)。组织中药物添加浓度分别为0.1 mg/kg、0.2 mg/kg、0.4 mg/kg时,肌肉样品中药物平均回收率为(80.21±0.95)%;肝脏样品中药物平均回收率为(75.37±5.04)%;肾脏样品中药物平均回收率为(78.84±2.78)%。日内、日间变异系数分别低于7%和10%。在该检测条件下,检测限可以达到0.02 mg/kg,可以满足鸡组织中尼卡巴嗪残留检测的要求。将尼卡巴嗪以临床推荐剂量(125 mg/kg)添加到饲料中饲喂肉鸡,连续给药2周,并在停药后分别于第0、1、2、3、4、5和6 d各宰杀5只鸡,研究尼卡巴嗪在鸡各组织中的残留消除情况,并进行休药期的估算。利用已建立的鸡组织中尼卡巴嗪残留HPLC检测方法测定组织中尼卡巴嗪标示残留物——DNC的浓度。检测结果表明,肝脏中DNC浓度最高,消除速度最慢,是尼卡巴嗪残留检测的靶组织,肌肉中药物残留相对较少且消除较快,肾脏中药物残留最少且很快消除。各组织中的DNC残留在停药后第4 d均降至最高残留限量(200μg/kg)以下,按照国内常用的实测浓度法估算休药期,建议尼卡巴嗪在鸡的休药期为4 d。
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