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环境中甾体化合物的荧光检测方法的建立与应用

论文摘要

睾丸酮丛毛单胞菌(Comamonas testosteroni,C.T.)中的3α-羟基类固醇脱氢酶/碳酰基还原酶(3a-HSD/CR)是降解环境中甾体类化合物的关键酶。本文通过同源整合的方法将绿色荧光蛋白(GFP)基因整合到C.T菌的染色体DNA中的3a-HSD/CR基因下游,得到C.T-GFP突变菌株。该突变株GFP的表达强度与甾体化合物的含量在一定范围内成正相关。比较了CT-GFP细胞体系和非细胞体系在检测甾体化合物时的差别,分别探讨了GFP的荧光强度与甾体化合物的浓度及作用时间关系。结果发现非细胞体系比细胞体系检测系统灵敏度高,并且两种生物检测系统对雌二醇检测灵敏度高于睾丸酮,且灵敏性达到龟级水平。利用非细胞体系检测方法对吉林省主要水源进行了检测分析,并与高效液相色谱法(HPLC)进行了对比,结果显示该方法具有可行性,并且检测的灵敏度高于高效液相方法6个数量级。本文所研究的荧光检测系统具有快速、操作简单、稳定、敏感等特点,为食品安全及环境监测提供新的技术方法。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 目录
  • 第一章 绪论
  • 1.1 引言
  • 1.2 甾体激素检测方法及研究现状
  • 1.3 问题提出
  • 1.4 研究目的及内容
  • 第二章 基因工程生物荧光突变菌构建
  • 2.1 实验材料
  • 2.2 实验方法
  • 2.3 实验结果与讨论
  • 第三章 建立甾体类激素荧光检测方法
  • 3.1 实验材料
  • 3.2 实验方法
  • 3.3 实验结果与讨论
  • 第四章 非细胞生物荧光检测系统的应用
  • 4.1 实验材料
  • 4.2 实验方法
  • 4.3 实验结果
  • 结论
  • 致谢
  • 参考文献
  • 相关论文文献

    本文来源: https://www.lw50.cn/article/b442878b15a5efeaa768edd7.html