动脉粥样硬化（AS）的炎症机制越来越引起人们的重视,Fractalkine （FKN）是新发现的一种在动脉粥样斑块中过量表达的趋化因子,介导白细胞的粘附和趋化和血管平滑肌细胞（VSMC）的迁移,促进血小板活化,增强自然杀伤细胞（NK）的细胞毒性作用,并刺激炎症因子表达,因此被认为参与介导动脉粥样硬化（AS）的炎症反应。蛋白激酶B（PKB又名Akt）是与炎症和白细胞的趋化过程密切相关的信号分子,通过介导白细胞的粘附和趋化、VSMC的迁移和血小板的活化而在AS的形成和进展中发挥作用。肿瘤坏死因子α（TNF-α）是一种炎症介质,损伤血管内皮细胞,促进内皮细胞表达粘附分子和趋化因子,刺激VSMC增殖,破坏凝血-抗凝血平衡,产生促炎症、促凝血反应,从而在AS的形成和进展中起重要作用。新近发现,血管紧张素转化酶抑制剂（ACEI）除了传统的降血压、抑制心肌及血管增厚作用之外,还有抗AS作用,包括抗炎、抗血栓形成和抗氧化作用。本实验将FKN、Akt和TNF-α联系起来,研究FKN对人单个核细胞Akt活化和TNF-α表达的影响,同时探讨磷脂酰激醇-3激酶（PI3K）和核因子κB（NF-κB）在Akt活化和TNF-α表达中的作用,以及卡托普利对二者的干预作用,以期进一步了解FKN在AS形成中的炎症机制、信号转导机制和卡托普利的抗炎机制。实验采用密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞（PBMC）,实验分5组,空白组、FKN组、FKN+LY294002组、FKN+PDTC组和FKN+卡托普利组,每组分2份,1份于45min时应用Western blot方法对磷酸化Akt半定量,另1份于24h时应用ELISA方法检测PBMC培养液中TNF-α浓度,观察FKN刺激PBMC后磷酸化Akt和TNF-α水平,并研究预先分别用PI3K的抑制剂LY294002、NF-κB的抑制剂吡咯基二硫氨基甲酸盐（PDTC）和卡托普利处理1小时,磷酸化Akt和TNF-α水平。研究结果表明FKN能够刺激人单个核细胞Akt磷酸化和TNF-α表达, PDTC可以部分抑制FKN刺激单个核细胞Akt的活化,LY294002和PDTC可部分抑制FKN刺激单个核细胞表达TNF-α,卡托普利可以减弱FKN对单个核细胞Akt磷酸化和TNF-α表达的诱导作用,FKN刺激单个核细胞Akt磷酸化和TNF-α表达密切相关。由此,我们认为FKN可能通过介导Akt磷酸化和TNF-α表达,参与AS的炎症反应过程,从而促进AS的进展。PI3K、NF-κB参与介导FKN刺激单个核细胞表达TNF-α,在FKN刺激单个核细胞Akt活化的信号传递的过程中,PI3K不是其上游信号分子,NF-κB则可以促进Akt磷酸化,FKN刺激单个核细胞Akt的磷酸化和TNF-α的表达密切相关。卡托普利减弱FKN对单个核细胞Akt磷酸化和TNF-α表达的诱导作用,可能是其抗AS机制之一。
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