研究背景败血症和败血症休克是危重症病人死亡的主要原因之一，病死率很高。败血症休克的发病机制是由于机体产生的过量细胞因子导致的全身炎症反应综合征。过量的细胞因子和细菌毒素可以诱导多种免疫细胞凋亡，导致机体免疫力降低，从而加重病情的发展。已证实细胞因子的基因和有关凋亡的基因由转录调节因子NF-κB调控。NF-κB是一种多效转录调节因子，它可被多种刺激物激活，活化后的NF-κB由胞浆进入胞核发挥多种生物学效应，调控靶基因的转录。Francisco等研究发现败血症患者NF-κB表达明显增加，败血症死亡病人体内的NF-κB活性更高。因此，败血症时NF-κB的活化程度与炎症转归有密切关系。研究发现重组人生长激素（Recombinant human growth hormone，rhGH）有免疫调节能力，可对外科危重症病人的预后产生积极影响。有实验证实rhGH可降低败血症大鼠体内TNF-a、NO的水平，改善其循环功能，减低重要脏器的损伤，显著提高败血症大鼠1周的存活率。因此我们思考：由于转录调节因子NF-κB调控着细胞因子的基因转录和凋亡程序，rhGH是否是通过改变NF-κB的活化程度来降低细胞因子的水平，是否对细胞的凋亡有保护作用?研究目的研究rhGH对LPS诱导的巨噬细胞凋亡和NF-κB的活化程度的影响，为败血症的治疗开辟新的方法提供科学依据。研究方法1、采用流式细胞术检测不同浓度rhGH对LPS诱导的巨噬细胞凋亡的影响，选择rhGH的最佳浓度，根据相关文献选择LPS的浓度，然后细胞分组：空白对照组、LPS组、rhGH+LPS组、rhGH组，每组设5个复孔。将细胞与药物共同孵育16小时后，应用流式细胞术检测各组细胞的凋亡率。2、同样的细胞分组，加药孵育16小时后，应用免疫细胞化学法检测各组巨噬细胞内NF-κB P65核移位的情况，用NF-κB P65阳性表达的细胞率来代表NF-κB的活化程度。研究结果1、rhGH对LPS诱导的巨噬细胞凋亡的影响：根据rhGH的量效实验选择rhGH的最佳浓度为4u／L，根据相关文献选择LPS的浓度为40μg／ml，将细胞与药物共同孵育16小时后，应用流式细胞术检测空白对照组、LPS组、rhGH+LPS组、rhGH组的细胞凋亡率分别为3.70±0.66％、9.1±2.40％、4.13±0.57％、3.65±0.66％。rhGH+LPS组的细胞凋亡率明显低于LPS组，P＜0.01。2、rhGH对LPS诱导的巨噬细胞内NF-κB的活化程度的影响：空白对照组、LPS组、rhGH+LPS组、rhGH组的NF-κB P65阳性表达的细胞率分别为1.67±0.20％、41.1±10.46％、9.3±1.9％、1.46±0.41％。LPS组的巨噬细胞内的NF-κB明显活化，rhGH+LPS组的巨噬细胞内的NF-κB的活化程度明显下降（9.3±1.9％VS41.1±10.46％），P＜0.01。结论1．rhGH抑制了LPS诱导巨噬细胞的凋亡效应。2．rhGH可能是通过抑制了NF-κB的活化来发挥对巨噬细胞的保护作用。
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