目的:(1)检测部分肿瘤及相应正常组织中neuritin的表达情况;(2)观察neuritin过表达对细胞生物学特性的影响,探讨neuritin与肿瘤发生发展的相关性。方法:(1)运用免疫组织化学技术分别检测5例肺癌、食管癌、子宫内膜癌、宫颈癌及相应正常组织中neuritin蛋白的表达情况。初步筛选出neuritin蛋白表达有差异的组织后,扩大其样本量利用免疫组化技术核实neuritin在肿瘤组织与正常组织的表达差异,并通过RT-PCR在新鲜组织中进一步验证免疫组织化学检测的结果。(2)利用稳定表达neuritin的BMSCs细胞,通过β-半乳糖苷酶检测观察neuritin对细胞衰老的影响; Annexin V-PI染色后,经通过流式细胞仪观察neuritin对细胞凋亡的影响。结果:(1)在上述组织中,免疫组化初步筛选结果显示,与相应正常组织相比,neuritin蛋白在子宫内膜癌、宫颈癌、食管癌组织中高表达;尤以肺癌与正常肺组织neuritin蛋白表达差异明显;进一步扩大肺癌及正常肺组织样本量,免疫组织化学结果显示,肺癌组织中neuritin蛋白表达高于正常肺组织,差异有统计学意义(p<0.01)。RT-PCR结果显示,neuritin基因在肺癌组织有较高表达,而在正常肺组织中未检测到neuritin基因的表达。(2)β-半乳糖苷酶检测结果显示,neuritin稳定过表达的骨髓间充质干细胞(BMSc-neu)阳性染色率(19.33±1.53%)低于阴性对照组(BMSc-3.1)阳性染色率(47.67±3.05%),差异有统计学意义(t=12.14,p<0.05);(3)Annexin V-PI染色结果显示;neuritin稳定过表达的骨髓间充质干细胞(BMSc-neu)早期凋亡率(25.11±1.17%)低于阴性对照组(BMSc-3.1)早期凋亡率(38.10±1.28%),差异有统计学意义(t =9.22,p<0.05)。结论:(1)neuritin在部分肿瘤组织的表达高于其相应的正常组织;(2)neuritin过表达能够延缓BMSCs细胞的衰老;(3)neuritin过表达能抑制BMSCs细胞凋亡。以上研究结果提示:neuritin作为抑制细胞凋亡的蛋白因子,可能与肿瘤的发生发展相关。
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