目的建立胆管癌细胞株QBC939裸鼠神经浸润模型,研究其稳定性和可重复性,探讨5’-AMP所致的生物学低温对胆管癌裸鼠移植瘤生长的影响及病理学改变。方法①复苏人胆管癌QBC939细胞并进行传代,培养足量胆管癌细胞后,接种入裸鼠背部皮下,建立人胆管癌QBC939细胞裸鼠原代移植瘤,然后将原代移植瘤组织接种于20只裸鼠腹腔。30天后处死腹腔传代移植瘤裸鼠,行种植瘤肿瘤组织解剖学和病理学检查,观察胆管周围神经浸润情况。②将前期制备的14只胆管癌成瘤裸鼠随机分成对照组和实验组,每组7只。实验组在腹腔内注射相关剂量的5’-AMP提纯物,对照组在腹腔内注射等量生理盐水,动态观测荷瘤裸鼠体温的变化曲线,第2天处死取瘤组织,监测指标:(1)HE染色,观察肿瘤坏死组织比例;(2)检测裸鼠血清肿瘤标志物CEA和CA19-9水平。结果1.背部原代移植瘤裸鼠接种5只,均有肿瘤生成,成瘤率为100%(5/5);腹腔传代移植瘤裸鼠接种20只,腹腔成瘤9只,其中2只伴有胆管周围神经浸润,成瘤率为45%(9/20),肿瘤胆管神经浸润率为22.2%(2/9)。2.3mg/g组裸鼠注射5’-AMP后平均于60 min体温为25℃时进入冬眠状态,平均于120 min降至最低,最低体温为22.0℃,持续约60 min,其后体温逐渐回升,于350 min左右体温基本恢复正常,第二天裸鼠全部存活,测体温平均36.3℃,生命体征平稳。3.5-AMP实验组肿瘤坏死组织平均百分比为(18.2±5.3)%,空白对照组肿瘤坏死组织平均百分比为(5.7±2.4)%,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组血清CA19-9和CEA水平分别为(318.6±102.9)U/ml和(11.9±0.8)ng/ml,对照组血清CA19-9和CEA水平分别为(452.7±118.3)U/ml和(13.1±0.9)ng/m1,差异有统计学意义(P<0.05)。结论1.本实验建立的动物模型为胆管癌神经浸润模型,成功率10%,其病理学特征与人类胆管癌一致。2.3mg/g的浓度是5’-AMP是能导致动物体温最低的最佳浓度,且多在注射后120分钟使裸鼠达到最低体温。3.5’-AMP所致的生物学体温不仅仅对胆管癌裸鼠移植瘤,对于其他的移植瘤均有抑制作用。
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