【目的】建立新生鼠脑缺氧模型,模拟临床新生儿缺氧缺血性脑病(HIE),通过对模型鼠电针刺激处理后,研究针刺对缺氧新生鼠脑中神经源性分化因子(NeuroD)表达及细胞增殖的影响,为针刺治疗HIE疾病提供实验依据。【方法】1.按照Grojean的方法:将出生10-24h内SD新生大鼠置于100%氮气的无氧环境中,建立HIE模型,并对所做的动物模型进行评价。2.将动物随机分为三组:对照组、缺氧组、缺氧+电针刺组,电针组采用临床所用电子治疗仪器,选取大鼠相应的穴位,每天持续30min,连续针刺10d后,通过RT-PCR、western blot及免疫荧光法检测NeuroD,免疫荧光法检测5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)表达的变化。【结果】1.缺氧过程中新生大鼠均出现神经异常的表现,如:躁动、意识障碍,并伴有全身紫绀,大脑皮质HE染色可见缺氧组鼠脑神经细胞损伤。2.免疫荧光示:神经干细胞聚集区大脑皮质、海马、SVZ等部位有NeuroD的表达。RT-PCR结果示:针刺组NeuroD mRNA表达量高于均正常组和缺氧组(P<0.01)。Western blot结果示:针刺组NeuroD/β-actin平均光密度均高于正常组和缺氧组(P<0.01)。针刺组NeuroD蛋白平均荧光强度均高于正常组和缺氧组(P<0.01);针刺组SVZ、DG部位BrdU表达量均高于缺氧组和对照组(P<0.01)。【结论】电针刺激能使鼠脑神经干细胞聚集区的大脑皮质、海马、SVZ等部NeuroD表达量增高,并可诱导细胞增殖,可能参与受损神经组织修复和功能重建。
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