目的: 观察四肽化合物CMSTl对类风湿性关节炎的治疗作用,并初步探讨其可能的作用机制。方法: 1.应用MTT法观察CMST1体内及体外对正常小鼠T淋巴细胞增殖的抑制作用;应用MTT法观察CMST1体外对正常小鼠混合淋巴细胞反应(MLR)的抑制作用;应用二硝基氟苯诱发小鼠的迟发型超敏反应(DTH),观察CMST1体内作用后对DTH的抑制作用。 2.建立大鼠佐剂性关节炎(AA)动物模型;测量各组大鼠的踝关节周长,观察CMST1对AA大鼠原发性及继发性踝关节肿胀的抑制作用;HE染色观察CMST1对AA大鼠踝关节病理改变的抑制作用;MTT法观察CMST1对AA大鼠T淋巴细胞增殖的抑制作用;ELISA法检测CMST1对AA大鼠腹腔巨噬细胞分泌炎性细胞因子IL-1β、TNF-α的影响。 3.建立类风湿性关节炎病人滑膜细胞体外原代培养的体系,用MTT法观察CMST1对滑膜细胞增殖的抑制作用;ELISA法检测CMST1对滑膜细胞培养上清分泌VEGF的影响。 4.建立人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)体外原代培养的体系,MTT法观察CMST1对HUVEC增殖的抑制作用;cell-ELISA法观察CMST1对HUVEC表面表达粘附分子ICAM-1和VCAM-1的抑制作用。 结果: 1.CMST1在体外给药剂量为0.01-100μg/ml之间能明显拮抗ConA诱导的T淋巴细胞增殖反应(P<0.05),抑制率为22.1%-44.9%。CMST1体内给药剂量为20μg/kg/d及40μg/kg/d时能抑制ConA诱导的T淋巴细胞增殖(P<0.05)。CMST1体外给药剂量为1-100μg/ml时能明显抑制BALB/c小鼠脾细胞和C57BL/6J小鼠脾细胞的MLR(P<0.05),抑制率为18%-56.4%。
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