本课题对改造后的深黄被孢霉发酵生产GLA进行研究,对其发酵培养基、培养条件、超声波辅助提取,尿包纯化进行研究确定其最佳工艺条件,为工业化生产提供技术参考。对改造后的深黄被孢霉发酵生产GLA培养基及培养条件进行优化,以GLA产量为指标,确定最佳培养基及条件。在单因素基础上,采用SAS8.2分析方法,确定最佳培养基为:葡萄糖7.66%,柠檬酸钠0.2%,磷酸二氢钾0.2%,硫酸镁0.05%,硫酸铵0.26%, pH5.91;在单因素基础上,采用方差分析确定最佳培养条件:发酵温度为28℃,发酵时间7d,装液量50 mL/250mL,接种量8%;对其促进GLA合成特性进行研究,有效提高GLA产量。通过研究可知,采用分段变温培养,能有效促进GLA合成和提高GLA产量。分段培养条件为:28℃培养5天后,20℃培养2天。采用超声波辅助提取GLA,通过研究得出,对GLA产量影响程度从大到小依次顺序为液料比>超声波处理时间>超声功率,在单因素基础上采用二次旋转组合设计响应面分析,得出最佳提取工艺为:超声时间40min,液料比为8:1,超声波频率366KHz,最优得率为899.26mg/L。尿素包合法纯化GLA的研究。以GLA含量为评价指标,利用正交实验确定包合反应的最佳条件,并采用气相色谱分析。实验得到最佳包合条件为:尿素:脂肪酸为4:1(W/W)、脂肪酸:乙醇为1:12(W/W)、包合温度为-25℃和包合时间为12h,微生物油脂中GLA含量为47.1%
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