目的探讨以骨形态发生蛋白-2（BMP-2）/β-磷酸三钙-透明质酸钠（β-TCP-HA）复合支架在裸鼠体内构建组织工程软骨的可行性。方法MSCs的分离和培养:拉颈处死2周龄实验SD大鼠,酒精浸泡消毒后取双侧股骨和胫骨,1ml注射器吸取含15%FBS的L-DMEM培养液反复冲洗骨髓腔,将冲出的骨髓液离心后弃上清获取细胞,经贴壁法提纯扩增培养大鼠MSCs至第3代。细胞支架的构建和实验分组:分别构建实验组:rhBMP-2/β-TCP-HA、对照组:rhBMP-2/β-TCP及空白组:β-TCP复合支架。利用负压吸引将MSCs种子细胞分别接种于支架内,并植于裸鼠皮下。实验观察指标:术后12周大体观察所获组织工程软骨的外观;HE染色观察各组软骨细胞形态及分布;甲苯胺蓝染色观察各组软骨细胞糖胺多糖（GAG）分泌情况;Ⅱ型胶原免疫组化染色观察各组软骨细胞胶原分泌。结果大体标本观察:实验组组织工程软骨体积较大较厚,柔韧有弹性,表面光滑,白色有光泽;对照组组织工程软骨体积稍小,表面欠平整,缺乏弹性;空白组移植物体积较小,表面粗糙,质地较硬脆。HE染色结果:实验组支架降解完全,软骨细胞外基质丰富;对照组支架大部降解,支架内形成岛状软骨增生;空白组支架部分降解,以纤维组织和脂肪组织为主,仅在支架边缘见少量软骨组织。GAG及Ⅱ型胶原免疫组化染色结果:实验组均呈强阳性;对照组GAG及Ⅱ型胶原免疫组化染色呈阳性;空白组GAG及Ⅱ型胶原免疫组化染色呈阴性。结论rhBMP-2/β-TCP-HA支架复合MSCs提供了一条可能有效的关节软骨修复途径,是目前软骨组织工程较为理想的细胞支架材料。
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