第一章 亮氨酸脑啡肽与磷脂模拟细胞膜的相互作用及其跨膜机制研究 研究背景 脑啡肽是一种首先从猪的脑组织中分离发现的阿片肽,其基本结构是Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu(Leu-enkephalin)或Tyr-Gly-Gly-Phe-Met(Met-enkephalin)。研究发现这些物质具有很多生理学特性。如抗炎、镇痛、免疫应答等。 实验证实脑啡肽通过作用于细胞膜内特异性受体蛋白而发挥其生物学效应,而这些受体蛋白包含着与磷脂的作用部位。尽管有关脑啡肽与磷脂膜的相互作用的报道很多,但绝大多数研究集中于对脑啡肽与受体蛋白结合后或与磷脂膜结合后的构象变化。本研究拟采用磷脂模拟细胞膜研究亮氨酸脑啡肽和亮氨酸脑啡肽酰胺与细胞膜相互作用机制,探讨亮氨酸脑啡肽能否跨越细胞膜,影响亮氨酸脑啡肽在磷脂膜上的跨膜作用及其跨膜效率的因素等。 方法 采用亮氨酸脑啡肽和亮氨酸脑啡肽酰胺与磷脂膜作用。磷脂膜分别由卵磷脂(EPC)、2-油酰基磷脂酰乙醇胺(DOPE)、大豆磷脂(SBPL)、胆固醇(Chol)和神经鞘髓磷脂(SM)等以不同的配比制成。用Zeta电位测定法(ZP)测定由上述磷脂组成的脂质体在加入亮氨酸脑啡肽酰胺后的肽-膜吸附作用情况。电生理学方法(膜片钳方法)和荧光光度分析法用于研究亮氨酸脑啡肽和亮氨酸脑啡肽酰胺分子在磷脂膜上的
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