目的:细胞色素P450（cytochrome p-450, CYP）2D6是CYP酶系中1个重要的亚型,其参与多种药物的代谢。制备抗人CYP2D6的单克隆抗体,为研究CYP2D6在药物代谢中的作用提供新的工具与思路。方法:以正常成人肝脏总蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠后,取小鼠的脾细胞与同系小鼠来源的骨髓瘤细胞融合,融合细胞在含有次黄嘌呤（hypoxanthine）、氨基喋呤（aminopterin）、胸腺嘧啶（thymine）和10%胎牛血清的DMEM培养基内培养,得到杂交瘤细胞。建立ELISA法以及CYP2D6特异性底物右美沙芬体外代谢实验法对杂交瘤细胞进行筛选。筛选出培养液对右美沙芬的代谢有抑制作用的阳性细胞株,有限稀释法对细胞稀释、培养后,再筛选。得到分泌特异性CYP2D6抗体的杂交瘤细胞,获得CYP2D6的单克隆抗体（monoclonal antibody,mAb）。测定其对右美沙芬代谢的抑制率,并比较单克隆抗体与化学抑制剂奎尼丁对右美沙芬代谢抑制率的影响。结果:（1）用正常人肝脏总蛋白免疫的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合得到了杂交瘤细胞。（2）应用ELISA方法,筛选468孔培养的杂交瘤细胞,共得到分泌IgG抗体的阳性孔135个,阳性率为28.85%。最后选择68孔继续筛选。（3）经右美沙芬体外代谢抑制试验,在68孔细胞中筛选出了1个孔的阳性杂交瘤细胞株。经三次有限稀释法培养和右美沙芬体外代谢抑制试验再筛选,对阳性杂交瘤细胞株进行纯化,确认其是单克隆细胞。这个单克隆细胞产生的抗体可以有效抑制CYP2D6对其特异性底物右美沙芬的代谢作用,抑制率达到90.21%。（4）比较获得的mAb抗与奎尼丁对右美沙芬代谢的影响,在加入的细胞培养液量为10、20、30、40、50μl时,mAb对右美沙芬的代谢抑制率分别为:90.15%、89.83%、89.86%、89.70%和89.89%;在加入的奎尼丁的终浓度分别为0.5、1、2、4、8μg/ml时,奎尼丁对右美沙芬的代谢抑制率分别为:41.01%、62.11%、85.71%、101.69%和99.25%。结论:用正常人肝脏总蛋白免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤细胞技术,经ELISA、右美沙芬体外代谢实验筛选,可以得到分泌特异性抗CYP2D6抗体的杂交瘤细胞,获得抗CYP2D6的单克隆抗体。这种抗体可以有效抑制CYP2D6的活性,其对右美沙芬代谢的抑制率达到90.21%,但不能完全抑制右美沙芬代谢,与化学抑制剂奎尼丁比较有较好的特异性。
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