前言 CD43（leukosialin）又叫涎福淋（sialophorin）,是一种大分子跨膜的唾液酸化糖蛋白,主要存在于人和鼠的胸腺细胞、T细胞、一些B细胞、单核细胞、中性粒细胞和血小板。人类的CD43 cDNA序列已被克隆,基因编码区定位于16p11.2带。该分子具有多种生物学作用:包括参与细胞间粘附调节,介导淋巴细胞活化时的信号传递,作为粘附分子发挥作用等。自Williams等人首次描述以来,对其研究有了一些进展,人们已在一些免疫缺陷病中发现了CD43的异常表达。近几年,更有人关注它与系统性红斑狼疮（SLE）之间的关系。本文的目的就是通过反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）技术手段检测CD43的基因在SLE患者外周血单个核细胞（PBMC）的表达与正常人相比是否有变化来探讨二者之间的关系,以便进一步了解SLE免疫学发生机理及CD43在自身免疫病中所发挥的作用。 实验材料与方法 1.真空BD采血管采集患者和健康人标本。 2.常规方法分离单个核细胞:淋巴细胞分离液分离,吸取界面所需细胞。 3.Trizol一步法提取总RNA。 4.引物设计:Primer3软件设计,上海生工公司合成。 5.RT-PCR:采用一步法RT-PCR试剂盒,在热循环仪中扩增出目的片段。 6.产物分析:琼脂糖凝胶电泳后,电泳凝胶成像分析系统对结果进行分析。 7.数据处理:t-检验处理代表基因表达水平的数据。
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