目的:研究离体情况下受低剂量照射的血液或骨髓细胞悬液,经离心后所得到的上层相(以下简称:“低剂量照射血浆”和“刺激液”)对正常细胞或辐射损伤细胞能否产生低剂量辐射兴奋效应。观察上述现象中第2信使O2-和第3信使c-fos的变化,并最终从信号传导角度探讨其发生机理。方法:首先将同一正常人的外周血细胞和受10cGy 或10Gy 照射的血细胞各自分别在含PHA 的1640 培养液中进行体外培养,以3H-TdR 掺入值衡量离体血细胞的增殖能力。采用正常血浆和“低剂量照射血浆”(10cGy 照射的人血,离心后提取的血浆)分别与正常血细胞或受过10Gy 照射的血细胞以不同组合方式,按上述方法进行共培养,并检测不同组细胞的增殖能力。小鼠骨髓细胞悬液分别给予0Gy、2Gy 和5Gy 的照射,然后将它们各自进行体外培养,使用MTT 比色法测量细胞的增殖活力。将“刺激液”(小鼠骨髓细胞悬液进行6cGy 低剂量照射,培养后离心抽取的上层相)与受0Gy、2Gy 或5Gy 照射的骨髓细胞悬液进行混合培养,观察各组细胞的增殖能力。同时采用细胞色素C 还原法测定细胞增殖活动中第2 信使O2-的浓度,以及运用免疫组化法测试第3 信使c-fos 的蛋白表达。最后,通过加入二亚苯基碘(DPI)和肉豆蔻醋酸酯(PMA)实验性、特异地降低或提高细胞中O2-的浓度,观察此种变化对“刺激液”产生上述作用的影响。结果:低剂量照射促进细胞增殖,大剂量照射导致细胞增殖活力下降。“低剂量照射血浆”能够对受大剂量照射的人血细胞产生明显的刺激效应,促进辐射损伤细胞的修复与增殖,同时对正常细胞也有一定的促增殖作用。正常骨髓细胞和受大剂量照射的骨髓细胞与“刺激液”共培养后,其细胞增殖能力明显高于对照组,且与细胞的O2浓度和c-fos 蛋白表达呈正相关。减少细胞中O2-的浓度可降低辐射损伤细胞的增殖活力,而增加细胞中O2-的浓度可提高辐射损伤细胞的增殖能力。不过,“刺激液”能够对抗DPI 所带来的不利影响。
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