目的:以实时荧光定量PCR（fluorescence quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR）的方法检测乳腺癌患者外周血中细胞角蛋白19（cytokeratin 19,CK-19）mRNA的表达情况,探讨其与手术,化疗,乳腺癌病理的关系及其临床意义。方法:将MCF-7乳腺癌细胞系与健康人外周静脉血混合,制备成含乳腺癌细胞106/ml,105/ml,104/ml,103/ml,102/ml,10/ml浓度的血液样品及未加乳腺癌细胞系的血液样品各5ml,提取mRNA行荧光定量PCR检测CK-19mRNA的含量,以判定本实验检测方法的灵敏度。选择我院II,III期女性乳腺癌患者60例做为研究对象。在手术前1天,术后1周内,术后化疗1周期后（术后第7～20天开始CEF方案化疗）分别空腹采集外周静脉血10ml,提取mRNA行荧光定量PCR检测CK-19mRNA的含量。选择我院20例乳腺良性疾病手术患者做为对照组,在术前采集外周静脉血,采集及检测方法同乳腺癌组。结果:102/ml及以上浓度的血液样品检测结果为阳性,证实此检测方法的灵敏度为可以在每107个血细胞中检测出1个乳腺癌细胞。对照组20例血液中均未检出CK-19mRNA。术前乳腺癌组血液CK-19mRNA阳性率为30.0%（18/60）,与对照组比较有显著差异（P<0.05）。术后1周内及术后化疗1周期后CK-19mRNA阳性率分别降至25.0%（15/60）和13.33%（8/60）。术后化疗1周期后检测结果较术前及术后1周内检测结果具有显著差异（P﹤0.05）。但术后1周内检测结果与术前比较却未见显著差异（P﹥0.05）。术前及术后II期与III期乳腺癌的CK-19mRNA的表达情况有显著差异（P<0.05）,III期阳性率高于II期。经检测发现CK-19mRNA的表达与激素受体情况、HER2表达情况无关（P>0.05）,而与神经及脉管受侵以及淋巴结转移情况有关,有神经及脉管受侵或淋巴结转移者CK-19表达的阳性率增高,与无神经及脉管受侵或淋巴结转移者有显著差异（P<0.05）。结论:以荧光定量PCR技术检测外周血CK-19mRNA的表达是检测乳腺癌血液微转移的敏感方法,可以在107个血细胞中检测到1个乳腺癌细胞。CK-19mRNA的表达与神经及脉管受侵以及淋巴结转移情况有关,与激素受体及HER2表达情况无关。随着肿瘤分期的增高,微转移检出率升高。术后化疗可能会降低血液微转移的阳性率。
本文来源: https://www.lw50.cn/article/d5a51231962b736c74320202.html