第一部分大鼠腭中缝牵张成骨的组织学研究目的:进一步阐明大鼠腭中缝牵张成骨的组织改建过程。材料与方法:以大鼠为实验动物,采用前牙区扩弓和后牙区扩弓两种方式,设立对照,研究两种扩弓方式对大鼠体重的影响。选用前牙区扩弓方式,设立对照,在不同时间点取腭中缝标本,制作脱钙切片,进行HE和Masson三色染色,以及增殖细胞核抗原(PCNA)和Ⅰ型胶原(CollagenI)免疫组织化学。结果:前牙区扩弓组的体重在实验后第三天开始恢复,而后牙取扩弓组的体重恢复相对缓慢。HE结果显示前牙区扩弓组第三天前无明显组织学变化,HE和Masson三色染色显第五天起软骨细胞和骨膜下细胞增殖,缝软骨吸收,后期成骨细胞增殖更明显。Masson三色染色显示实验组缝软骨与骨突交界处有明显的新骨基质形成。Ⅰ型胶原免疫组化显示实验第九天已有新骨长入扩宽的腭中缝。结论:前牙区扩弓方式对大鼠机体的影响相对较小;扩弓第三天体重回复而且无明显组织学变化,此时较适宜作蛋白质组学研究;大鼠腭中缝牵张成骨的成骨方式是软骨内成骨和膜内成骨的结合,早期软骨内成骨较明显,晚期以膜内成骨为主。第二部分大鼠腭中缝牵张成骨的蛋白质组学研究目的:更全面了解大鼠腭中缝牵张成骨的分子调控机制。材料与方法:收集第三天实验组和对照组的腭中缝组织蛋白样本,进行二维电泳和质谱,质谱检测的部分蛋白进行western blot验证。结果:质谱检测出实验组中的22个高表达蛋白质,western blot验证结果符合二维电泳结果。结论:在大鼠腭中缝牵张成骨中有多个蛋白高表达,这些蛋白质分别参与了组织改建的不同过程。
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