本实验以载脂蛋白A-Ⅰ（ApolipoproteinA-Ⅰ,ApoA-Ⅰ）为研究目标,主要围绕两方面展开课题:一、利用腺病毒基因表达系统建立人ApoA-Ⅰ过表达小鼠模型;二、重点研究小鼠ApoA-Ⅰ过表达对内毒素（lipopolysacharide,LPS）诱导的系统性炎症和组织损伤的保护作用。V型腺病毒载体构建携带人ApoA-Ⅰ基因的重组腺病毒（AdV-AI）,静脉注射6周龄BALB/c小鼠,利用V型腺病毒的亲肝细胞性,使其携带的人ApoA-Ⅰ基因在小鼠肝脏富集表达;通过蛋白水平和mRNA水平的检测,确认人ApoA-Ⅰ的过表达,建立人ApoA-Ⅰ小鼠肝脏过表达模型。利用该模型小鼠,观察ApoA-Ⅰ在LPS诱导的小鼠系统性炎症和组织损伤中的保护作用。分别检测ApoA-Ⅰ高表达对小鼠血浆脂质水平（HDL-胆固醇、总胆固醇及甘油三酯）、HDL颗粒的变化影响及对LPS诱导小鼠系统性炎症一系列相关指标的影响,包括:1、血清和肺灌洗液（BAL）中细胞因子TNF-α,IL-6,IL-1β的水平;2、肺和肝脏组织CD14的表达水平;3、血清中肌酸激酶（creatine kinase,CK）和肌酐（creatinine,CRE）的水平;4、肾脏和肺脏的组织病理学检查。本实验获得如下结果:小鼠体内人ApoA-Ⅰ过表达导致小鼠体内若干指标出现以下变化:1.小鼠血清中人ApoA-Ⅰ水平显著高表达（P＜0.01）,但没有引起小鼠自身血清ApoA-Ⅰ浓度的变化;2.小鼠血清中总胆固醇、HDL胆固醇和甘油三酯含量增加,其中总胆固醇增加84%（P＜0.01）,HDL胆固醇增加51%（P＜0.01）,甘油三酯增加69%（P＜0.05）;3.小鼠血清中出现新的人源化的HDL;4.显著降低LPS炎症小鼠血清和肺灌洗液中TNF-α,IL-6,IL-1β的水平;5.显著降低肺和肝脏组织LPS诱导的CD14 mRNA表达（P＜0.01,P＜0.05）;6.显著抑制LPS诱导的血清中CK和CRE的增加（P＜0.05）;7.减轻LPS诱导的肾脏和肺组织损伤。结论:1.小鼠肝脏人ApoA-Ⅰ过表达可以引起血清脂质的变化,小鼠体内出现人源化的HDL;2.人ApoA-Ⅰ过表达在LPS诱导的小鼠系统性炎症和组织损伤中具有保护作用;3.ApoA-Ⅰ的抗炎症功能一方面可能是通过抑制体内炎症细胞因子的生成,另一方面可能是通过调节效应细胞表面CD14的表达。
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