目的探讨miR-22对卵巢癌浸润转移的抑制作用,及其卵巢癌细胞生长、凋亡水平的影响,初步筛选出miR-22发挥作用的潜在靶基因,为调控研究打下基础。方法（1）用Real-time RT-PCR验证miR-22在两对不同侵袭能力的SKOV-3/SKOV-3ip细胞、HO-8910/HO-8910PM细胞中的表达差异,同时选取SKOV-3/SKOV-3ip细胞用于以下实验；（2）在相对低表达miR-22的SKOV-3ip细胞中,用miR-22 Precursor上调其内源性miR-22的表达水平,观察卵巢癌细胞侵袭能力及细胞生长、凋亡水平的改变；在相对高表达miR-22的SKOV-3细胞中,用miR-22 Inhibitor抑制内源性miR-22的表达水平,观察卵巢癌细胞侵袭能力及细胞生长、凋亡水平的改变；（3）生物信息学数据库（TARGETSCAN: http://www.targetscan.org、MIRANDA:http://www.microrna.org和PICTAR: http://www.pictar.mdc-berlin.de）预测miR-22下游与卵巢癌浸润转移转移相关的靶基因；选取其中一个靶基因Tiam1,用双荧光素酶报告基因实验、Western Blot及Real-time RT-PCR共同验证miR-22对Tiam1的调控作用。结果（1）Real-time RT-PCR验证发现,miR-22在高侵袭力的卵巢癌SKOV-3ip细胞和HO-8910PM细胞中均呈相对低表达,其差异方向与我们前期芯片结果一致；（2）在SKOV-3ip细胞中,过表达miR-22则能显著抑制其浸润和迁移能力；在SKOV-3细胞中,降低miR-22表达的能显著促进卵巢癌细胞的浸润和迁移能力；但改变miR-22表达对卵巢癌细胞的生长及凋亡水平无明显影响；（3）生物信息学数据库分析发现,miR-22下游有多个与浸润转移相关的靶基因；对Tiam1进行调控验证后发现,Tiam1是miR-22的直接靶基因；Western Blot及Real-time RT-PCR进一步发现miR-22对Tiaml具有负向调控作用。结论miR-22对卵巢癌浸润转移具有负向调控作用,其功能可能通过靶向Tiam1介导。
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