为有效地防范尼帕病毒（Nipah virus, NiV）在我国的发生和流行,建立必要的检测与诊断技术,本研究首先利用原核表达系统成功地表达了NiV的融合基因（F）的F1片段和糖蛋白基因（G）（均去掉跨膜区和信号肽）,所表达的目的蛋白以包涵体的形式存在,对所表达的蛋白进行了纯化。ELISA、Western blot检测证实所表达的蛋白能特异的被兔抗NiV阳性血清识别,表明所表达的蛋白可用于NiV抗体的检测。在杆状病毒表达系统中,对转移载体pFast-Bac1进行了改造,获得了含有NiV F1、G基因的重组杆状病毒rAcNPV-NF1、rAcNPV-NG,接种sf9细胞实现了NiV F1、G蛋白的分泌性表达,IFA检测表明蛋白能特异的被兔抗NiV阳性血清识别,提示所表达的蛋白可以作为病毒血清抗体检测的备选抗原。利用原核表达且纯化的蛋白免疫实验家兔,制备了针对蛋白的高效价、特异性的血清,Western blot、IFA检测证明所制备的高免血清具有良好的特异性,为建立病毒血清中和试验及间接免疫荧光试验打下基础。
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