研究目的通过体外培养大脑皮层细胞,并进行不同低氧浓度处理,观察低氧对大脑皮层细胞凋亡的影响;检测在不同低氧浓度处理后大脑皮层细胞NO水平和活性氧水平,探讨低氧对大脑皮层细胞凋亡及ROS、NO产生水平的影响机制。研究方法分离新生24小时内的Sprague-Dawley（SD）大鼠大脑皮层并进行体外细胞培养,以密度7×105细胞/ml,接种于4个24孔板中。实验设10%、0.5%两个低氧浓度,每个氧浓度均设相应的常氧对照（20%氧浓度）,并且每个氧浓度细胞接种4个复孔,具体分组及低氧处理方式如下:细胞培养24小时后,低氧组进行相应浓度低氧处理,时间为2小时,低氧处理结束后,用流式细胞仪进行细胞凋亡及细胞ROS水平检测,ELISA法检测NO。实验重复三次。研究结果1.低氧对大脑皮层细胞凋亡的影响:低氧处理组与相应的常氧对照组比较,10%氧浓度处理组细胞凋亡百分率明显大于常氧对照组（p<0.05）;不同氧浓度之间进行比较,差异不具显著性,但0.5%氧浓度诱导细胞凋亡率有低于10%氧浓度的趋势。2.低氧对大脑皮层细胞产生ROS的影响:低氧处理组与相应的常氧对照组比较,低氧组细胞产生的活性氧显著低于常氧对照组（p<0.05）;不同氧浓度之间进行比较,差异不具显著性。3.低氧对大脑皮层细胞产生NO的影响:低氧处理组与相应对照组比较,低氧组产生的NO多于常氧对照组,但差异不具显著性,存在低氧诱导细胞产生NO的趋势;不同低氧浓度对细胞NO产生的影响进行比较,无明显差异。研究结论1. 10%低氧浓度可提高大鼠大脑皮层细胞凋亡的发生率。2. 10%、0.5%氧浓度均抑制大鼠大脑皮层细胞产生ROS。3. 10%氧浓度有诱导大鼠大脑皮层细胞产生NO的趋势。
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