本文采用双光子激发荧光（TPE fluorescence）技术，研究光敏剂5-ALA在滤泡性淋巴瘤白血病（DHL）细胞内转化并积聚成光敏性物质PpⅨ的动力学过程，基于双标的荧光标记方法研究5-ALA代谢的PpⅨ在DHL细胞的分布，并以输出波长为630nm的半导体激光器为光源，对5-ALA体外杀伤DHL细胞优化参数进行了初步实验研究。首先，简要介绍了白血病的相关基础知识以及目前治疗白血病常用的方法，介绍了体外净化白血病细胞的方法和基于光动力应用体外净化白血病细胞的研究进展；同时介绍了激光扫描共聚焦显微镜的原理，双光子荧光技术的原理和优点，及其在细胞生物学中的应用。其次，尝试使用双光子激发荧光光谱的方法，在Lambda模式下，利用META探测系统获得DHL细胞在不同浓度的5-ALA及不同孵育时间下，代谢并积聚的PpⅨ的特征荧光强度，从而间接获得5-ALA在DHL细胞中的代谢动力学过程。同时结合内质网、线粒体、溶酶体等细胞器荧光探针的使用，采用双光子激发，双通道接收方法获得细胞器探针和PpⅨ荧光图像，并对获得的荧光融合图像进行处理，通过计算细胞器荧光图像与PpⅨ荧光图像的相关系数R，进而获得PpⅨ在DHL细胞中不同细胞器的定位分布情况。进而，利用630nm半导体激光对白血病DHL细胞进行体外杀伤的初步实验研究，获得不同光辐照功率密度和光剂量组下ALA-PDT对DHL细胞杀伤率的优化参数。最后，总结了本论文的主要研究内容和结果，介绍了论文的主要创新之处，并提出今后拟开展的研究内容。
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