骨形态发生蛋白-2（Bone Morphogenetic Protein-2,BMP-2）作为一种强效诱骨因子,可诱导具有成骨分化潜能的间质细胞向成骨细胞分化,在牙周组织再生和修复中具有重要的作用。但将外源性生长因子直接植入缺损部位,其存在的时间及浓度是有限的,往往难以达到牙周组织完全再生的需要。基因治疗技术引入牙周病治疗的研究领域,为促进牙周组织的完全再生提供了新的方向。将DNA导入宿主的方法和途径是多种多样的,其中裸质粒直接注射法是公认的一种既简便又有效的方法,并且安全性高,被认为是基因治疗的发展方向。但是质粒的转染效率较低,所以寻找提高质粒转染效率的方法是目前基因治疗研究的热点之一。最近,国内外学者研究发现超声微泡造影剂可作为一种新型的体内基因转染载体,在一定条件的超声照射下能促进目的基因安全而有效的定向转移,增加外源性基因转化率和表达水平,该方法有可能成为基因治疗研究中新的突破点。因此本实验采用超声微泡破裂法将含增强型绿色荧光蛋白的重组BMP-2质粒pIRES-rhBMP2-EGFP进行小鼠后肢骨骼肌体内转染,研究微泡造影剂在超声作用下能否促进BMP-2基因在小鼠体内表达,为其介导的BMP-2直接基因疗法在牙周再生中应用的可行性提供初步实验数据。方法:24只BALB/c小鼠随机分为4组,每组6只,A组和B组选择右侧胫前肌为注射点,其中A组注射质粒,B组注射质粒与微泡造影剂的混合液后用超声辐照,质粒注射量为30μg;C组和D组选择右侧股四头肌为注射点,其中C组注射质粒,D组注射质粒和微泡造影剂的混合物后用超声辐照,质粒注射量为100μg。7天后处死A组和B组小鼠,取小鼠胫前肌在倒置荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达情况,14天后处死C组和D组小鼠,取股四头肌免疫组化检测hBMP-2表达情况。结果:7天后B组绿色荧光阳性肌纤维百分率高于A组（P＜0.05）;14天后,C组和D组都可检测到hBMP-2的表达,但D组hBMP-2表达量多于C组（P＜0.05）。结论:超声介导微泡破裂法能增加外源性BMP-2基因在小鼠体内骨骼肌转化率和表达水平。这些结果提示超声介导微泡破裂法可为牙周BMP-2直接法基因治疗提供一种新型方法。
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