目的:探究体内转染腺病毒载体Ad/CMV-hTGF-β1对兔椎间盘退变的保护作用,主要是对椎间盘髓核细胞中Ⅰ型、Ⅱ型胶原和成纤维细胞生长因子(FGF)的表达的影响,并初步讨论其可能的作用机制,为椎间盘退变的生物学预防与治疗提供理论基础。 方法:纯种成年新西兰大白兔20只,随机分为实验组和对照组,每组10只。采取腹部手术入路,逐层切开软组织,暴露腰椎间盘,用微量注射器取本院骨科实验室构建的腺病毒为载体的Ad/CMV-hTGF-β1(滴度为6×106pfu)20微升直接注射于腰4,5椎间盘髓核内;对照组仅进行相应的外围手术操作,椎间盘未做任何处理。手术后3周取出椎间盘组织,常规石蜡包埋,组织切片,通过普通HE染色观察髓核组织细胞学形态;用免疫组织化学方法染色显示各组椎间盘组织髓核细胞中Ⅰ型、Ⅱ型胶原含量的变化和成纤维细胞生长因子(FGF)的表达情况;并用VIDAS图象分析系统进行半定量分析。 结果:普通HE染色结果显示2组椎间盘髓核组织形态基本相同。免疫组织化学染色显示:实验组椎间盘髓核细胞内Ⅰ型胶原的表达比对照组低,OPTDM值分别为实验组0.1804±0.0211,对照组0.2768±0.0161,统计学比较差异有显著性(P<0.05);Ⅱ型胶原的表达结果则正好相反,实验组比对照组高,OPTDM值分别为实验组0.6936±0.0312,对照组0.5068±0.0235,统计学比较差异有显著性(P<0.05);实验组椎间盘髓核细胞FGF的表达比对照组高,OPTDM值分别为实验组0.4354±0.01940,对照组0.3178±0.01630,统计学比较差异有显著性(P<0.05)。 结论:体内转染腺病毒载体Ad/CMV-hTGF-β1能降低椎间盘髓核细胞Ⅰ型胶原的表达、提高Ⅱ型胶原和FGF的表达。这与hTGF-β的生物学特性相关,由此可以认为体内转染腺病毒载体Ad/CMV-hTGF-β1可能会阻止椎间盘组织退变的发生发展。
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