本课题旨在研究β-arrestin 2对原发性胆汁性肝硬化（PBC）中自身免疫反应以及自身免疫相关基因的调节作用,阐明β-arrestin 2在PBC疾病进程中的分子调控机制,为探讨有效治疗PBC的新途径提供依据。首先采用实时荧光定量PCR和Western-blotting技术,分别从基因转录和蛋白表达水平分析β-arrestin 2在PBC患者外周血单个核细胞（PBMCs）中的表达;再通过注射poly I:C,在β-arrestin 2转基因和β-arrestin 2基因敲除鼠中建立PBC动物模型,确认β-arrestin 2在PBC发病中的作用;然后培养来源于PBC患者PBMCs的PDC-E2特异性自身反应性细胞毒性T细胞（ CTLs ）,并通过转染pcDNA3/β-arrestin 2质粒和pBS/U6/β-arrestin 2siRNA质粒,研究β-arrestin 2对细胞增殖反应、细胞毒活性、AICD和自身免疫相关基因TNFSF8、CCL2等表达及其启动子区域组蛋白乙酰化的影响,探讨β-arrestin 2对PDC-E2特异性自身反应性CTLs的调控作用。结果表明,β-arrestin 2在PBC患者PBMCs,尤其是CD4+T、CD8+T和单核细胞中的表达明显降低;β-arrestin 2能够抑制polyI:C诱导PBC样病变的产生;在来源于PBC患者PBMCs的PDC-E2特异性自身反应性CTLs中,β-arrestin 2能够负调节细胞的增殖反应、细胞毒活性和AICD,并通过调节启动子区域组蛋白H4的乙酰化水平进而对TNFSF8、CCL2等自身免疫相关基因的表达进行调控。因此,β-arrestin 2在PBC疾病进程中可能起负调节作用,并通过负调节自身免疫相关基因启动子区域组蛋白H4的乙酰化水平,进而影响PBC疾病进程。
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