以糖异生和脂肪动员紊乱为病理学基础的酮病和脂肪肝是奶牛围产期常见多发的能量代谢障碍性疾病。哺乳动物的GLP-I序列完全保守,指示其具有重要的生理作用。本研究通过牛肝细胞原代培养实验和实时荧光定量PCR方法,探讨了GLP-I对丙酮酸羧化酶、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶基因表达的调控作用,为揭示奶牛脂肪肝等围产期能量代谢障碍性疾病肝糖异生的调控提供实验和理论依据。通过比较剪切法和灌流法两种肝细胞的培养方法,证实采用灌流法方法培养的肝细胞,去除红细胞效果好,所分离的肝细胞较纯,细胞存活率高,贴壁效果好,可满足实验的要求。采用实时荧光定量PCR技术,测定了细胞培养液中添加不同浓度的GLP-I对新生犊牛单层原代培养肝细胞中PC mRNA和PEPCK mRNA表达水平的影响。结果表明:①随着细胞培养液中GLP-I浓度的增加,肝细胞PEPCK mRNA丰度呈先升高后降低趋势,各浓度组之间差异显著（P<0.01）②随着细胞培养液中GLP-I浓度的增加,肝细胞PC mRNA丰度呈先升高后降低趋势,各浓度组之间差异显著（P<0.01）。
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